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可视化UNG-LAMP试剂盒(可视化防污染LAMP试剂盒)
Colorimetric UNG-LAMP Kit
产品及特点 本试剂盒是本公司可视化 LAMP 试剂盒的升级版,它有下列特点:
1. 防污染,在 2×可视化 LAMP MagicMix 中整合了 dUTP-UNG 防污染系统,解决了 LAMP 扩增非常容易污染的这个棘手问题。
2. 可视化,整合了本公司的 A 型 LAMP 可见光染料,不需要任何仪器即可肉眼判断是否有扩增。
3. 使用改良的 Bst DNA 聚合酶,使本产品既可用 DNA 为模板于 LAMP 扩增,也可用 RNA 模板进行 UT-LAMP 扩增。DNA 聚合酶只有在 40℃以上时扩增才启动,反应特异性更强。
4. 扩增效率更高,扩增效率可达到上亿倍,比 PCR 灵敏一个数量级,可检测到单拷贝的 DNA 分子。
5. 本试剂盒足够 50 次 20uL 体系的可视化 UNG-LAMP 和 UNG-RT-LAMP扩增。
6. 本试剂只能用于科研,不能用于临床。
运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂 LAMP 模板、RT-LAMP 模板及 LAMP 引物
使用方法 1. 配制自备的5×LAMP引物混合液:先加超纯水(不要用TE)将各引物干粉 稀释到下表所列母液浓度,然后在一新的离心管中按表中所列加入量加入各 种引物母液和自备超纯水,最后得到1mL的5×LAMP引物混合液。如果不 使用Loop引物,其体积由水填充如果需要配制的5×LAMP引物混合液体积 大于或小于1mL,则各成分的用量请按比例调整。此混合液可以在-20℃放 置2年。
2. 在新的反应管中设置UNG-LAMP或UNG-RT-LAMP反应:
3. 混匀,此时反应液呈现非常浅的绿色,由于是否有反应是跟阴性对照和反应前对比,所以一定要设置阴性对照,并且反应前要手机照相留存以供反应后比对。
4. 置于25℃5分钟(让UNG灭活可能的LAMP的污染),然后放63℃扩增60-120分钟(如果不使用Loop引物,则最好保温2小时)。如果是在PCR仪中保温,必须加热盖。如果用金属浴保温,没有热盖,必须在孔中加水以填充孔和管子间的空隙,并且在管中加50uL石蜡油,否则保温期间反应体系的水分会蒸发,影响反应效率)。
5. 80℃10分钟灭活Bst DNA聚合酶和UNG酶。
6. 如果有阳性扩增,则反应液将变成绿色,如果没有阳性扩增
7. 如果需要电泳确认,则取扩增产物5 uL直接在2%的琼脂糖凝胶电泳(不需 要再加上样液),可见LAMP特征性电泳图谱。一般不简易在开盖,这正式 产生污染的原因。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!