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TdT加尾法DNA探针标记试剂盒

TdT加尾法DNA探针标记试剂盒

价格: 990

品牌:泽叶生物

供货周期: 现货

货号:ZY60605A-5

规格:5次

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TdT加尾法DNA探针标记试剂盒

TdT-Tailing DNA Labeling Kit

产品特点:
1.快速,15分钟即可完成标记反应。
2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记,还可用于3′突出的双链DNA标记,但后者标记效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高辛标记的核苷酸等)。
4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高辛标记核苷酸三种选择。
5. 同时提供非标记的dATP,用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。

试剂盒组成:

成分规格
TdT缓冲液,5×20μl
TdT(末端转移酶,10U/μL)10μl
dATP,2mM5μl
标记核苷酸(A、B、C不同,见注)
超纯水1ml
说明书1份


注:A型用于自选标记,用户需自备标记核苷酸,本产品不提供标记核苷酸;B型提供5μl Biotin-11-dUTP;C型提供含5μl DIG-11-dUTP。

储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

使用方法:
1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针,请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度):

成份用量
探针DNA100-200 pmol
TdT Buffer,5×4μl
标记核苷酸,1mM
(A型需自备标记核苷酸)
1μl
dATP,2mM(见下注)
TdT末端转移酶(10U/μL)2μl
超纯水补到20μl


注:dATP可以不加,但这样得到的加尾全部是标记核苷酸,由于空间阻碍,灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好,掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中,以控制标记的密度,提高比活。具体比例如何可以自己优化。
2. 37℃反应15分钟,延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在,一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长);如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本试剂盒只提供dATP而已),每条探针上可加上约100个核苷酸,平均含5个标记核苷酸
3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
4. 如果需要,可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率,带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
5. 如果是非同位素标记,探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针,请不要酚/氯仿抽提,因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA,加入前还需热变性)。如果不立即使用,非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年,同位素标记的探针DNA不能放置。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!




生化试剂 TdT加尾法DNA探针标记试剂盒由上海泽叶生物科技有限公司为您提供,如想了解更多关于生物分子 TdT加尾法DNA探针标记试剂盒的报价、规格、厂家等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应TdT加尾法DNA探针标记试剂盒外,上海泽叶生物科技有限公司还可为您提供: 彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)、 Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water 、 彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)
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