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红细胞裂解液B型(流式细胞分析用)
Red Cell Lysis Solution,Type B
本品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其他淋巴细胞的完整性和生物学活性。由于红细胞是血液的主要细胞成份,不含DNA和RNA,其所含血红素能抑制PCR反应,所以先用本产品裂解红细胞,再提取基因组DNA或RNA 有助于提高所得样品纯度。
产品特点:
1.可以处理人全血、小鼠全血、脾细胞中的红细胞。
2.高效,一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞,能回收90%左右的白细胞。一般样品最多只需要处理两次。
3.扩容性好,可以一次处理多达几十毫升的样品,也可以处理100μL的血液。
4.基于NH4Cl 裂解法,得到的白细胞主要用于流式细胞分析。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
用去离子水将本产品(10×)稀释为1×工作液(1mL 本产品加9mL去离子水),待温度回到室温或37℃加热到37℃的时候再使用。工作液不能长期放置,只能现配现用。
一.裂解哺乳动物全血中的红细胞
1.离心哺乳动物抗凝血液后弃血浆部分,按每1mL 哺乳动物抗凝血液细胞沉淀加10mL 1×工作液的比例加入红细胞裂解液B型的1×工作液。
2. 轻柔吹打充分混匀。
3.室温放置 15分钟(注意:放置时间不要超过15分钟)。
4. 4℃1000rpm离心10分钟,吸弃红色的上清液。
5. 如果红细胞裂解不完全,可以重复第 1-4 步。
6. 用适当的自备缓冲液(如Hanks溶液)重悬白细胞沉淀。
7. 用于细胞计数和流式细胞分析等后续试验。
二.裂解组织细胞中的红细胞
1. 按标准方法用自备的胰酶将组织消化成单个细胞悬液,离心弃上清。
2. 按 1:10的比例向细胞沉淀中加入红细胞裂解液B型工作液,轻柔吹打均匀。
3.室温放置 15分钟(注意:放置时间不要超过15分钟)。
4. 4℃ 1000rpm离心10分钟,吸弃红色的上清液。
5. 如果红细胞裂解不完全,可以重复第 2-4 步。
6. 用适当的自备缓冲液(如 Hanks溶液)重悬白细胞沉淀。
7. 用于细胞计数和流式细胞分析等后续试验。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!