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Alexa Fluor 488 Mouse anti-Human CD63
Catalog No. | Size | Clone |
NHA063-AF488-50T | 50 Tests | 4AH5C6 |
NHA063-AF488-100T | 100 Tests | 4AH5C6 |
使用体积:10 μl / Test
储存条件:4℃避光保存,勿冻融。
储存缓冲液:PBS with 0.2% BSA , 15 mM Sodium azide ( pH 7.4 )
应用范围:Flow NanoAnalyzer / Flow Cytometry / Immunofluorescence
背景介绍:
外泌体(Exosomes)已经成为热门的研究对象,其在液体活检领域显示出了巨大的应用前景。Exosomes广泛存在于细胞培养液以及血液、乳汁、尿液、腹水等多种复杂的生物环境中,且不同来源甚至同一来源的Exosomes在尺寸、形态和生化特性等方面都存在着很大差异,有效的抗体和检测手段是目前Exosomes研究的两大瓶颈。本抗体专门为外泌体蛋白检测而设计,配合本公司Flow NanoAnalyzer能够实现对单个外泌体的蛋白进行分析。
CD63主要表达在细胞外囊泡的表面,分子中有4个疏水区,往返4次穿过细胞膜,与其它多种同源性膜蛋白共同组成“4次跨膜蛋白”(Tetraspanin)超家族。目前的研究表明CD63是外泌体的标志物,并且在与受体细胞相互作用方面发挥重要功能。
建议使用方法:
1. 用超速离心或者试剂盒提取Exosomes,将其用PBS溶解。
2. 取50 μl的样品,加入10 μl的Alexa Flour Mouse anti-Human CD63抗体混匀,37℃避光孵育30 min。
3. 加入1 ml PBS , 4℃, 10 0000 g离心去除游离染料,弃上清。
4. 加入1 ml PBS 重悬沉淀,4℃, 10 0000 g离心去除游离染料,弃上清。
5. 用100 μl的PBS重悬沉淀,获得样品。
6. 用纳米流式(Flow NanoAnalyzer)或者流式(FCM)检测样品。
实验参考图:
肿瘤腹水外泌体CD63免疫荧光标记
注意事项:
1. 由于试剂盒提取的Exosomes不能去除蛋白聚集体等小颗粒,会导致测定背景偏高,颗粒数偏多,建议用超速离心的方法提取Exosomes。
2. 实验空白对照使用PBS,或者是溶解外泌体的缓冲液。
3. 标记完需要进行超离去除游离染料,需考虑外泌体回收效率问题,建议用较高浓度外泌体进行标记。
4. 本产品仅供科学研究,不用于临床诊断。