获取电话生物大分子药物早期发现
(1)抗体药物早期发现
鼠源抗体
嵌合抗体
人源化抗体 (CDR移植，定点突变)
双特性抗体（e.g. CD3, PDL-1）
抗体片段（e.g. ScFv, Fab）
(2)表达纯化
重组蛋白表达 Ecoli, CHO
蛋白偶联标记：生物素、酶或荧光偶联
杂交瘤抗体少量制备：体外（转瓶）或体内（腹水）
抗体纯化：抗原亲和吸附、离子交换、Protein A/G/L
抗体生产：瞬时转染 HEK293, CHO，稳转细胞株构建
(3)单抗，多抗，及双抗
基因密码子修饰，表达纯化
多动物种属：SPF级小鼠、兔、豚鼠
AAALAC 动物设施
弗氏佐剂免疫，快速免疫
细胞融合及亚克隆筛选
杂交瘤抗体可变区测序分析
双抗构建 iPhaseCross平台技术
(4)鉴定及鉴别
含量分析（UV-Vis A280， BCA）
纯度：SDS-PAGE， HPLC
抗体亚型鉴定
种属特异性
结合活性/亲和力: EC50, KD, Kd, Ka (ELISA，BlitZ)
双特异性抗体结合活性
中和活性：IC50
(5)抗药性抗体ADA
免疫方法开发
筛选试验
确证试验
滴度试验
中和试验
试剂盒定制生产
(6)生物活性及功能
ADCC和 CDC试验
细胞迁移, 细胞增殖, 细胞毒性试验
细胞因子激活试验
信号转导，蛋白磷酸化试验
报告基因检测
双特异性抗体的结合试验
靶点选择性
体内PD和PK研究：大鼠，小鼠，犬，猴
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NKT细胞 Natural killer T cell、
组织交叉反应组织切片 Tissue Cross-reactivity, TCR、
人M2巨噬细胞 Human Macrophages M2
