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仪器信息网试剂标物生化试剂生物分子 pFastBac-GST-C昆虫胞内质粒

耗材通第 2 年

上海钦胜生物科技有限公司

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pFastBac-GST-C昆虫胞内质粒

价格：￥ 980

品牌：钦胜生物

供货周期：现货

货号：QSP0442

规格：2UG

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pFastBac-GST-C昆虫胞内质粒

基本信息

启动子: Polyhedrin

复制子: pUC ori，F1 ori

终止子: SV40 poly(A) signal

质粒分类: 昆虫细胞载体；杆状病毒组成型表达质粒

质粒大小: 5468bp

质粒标签: N-3C，N-GST

原核抗性: 氨苄青霉素Ampicillin

筛选标记: 庆大霉素Gentamicin

克隆菌株: DH5α

培养条件: 37℃，有氧，LB

表达宿主: 昆虫细胞

诱导方式: 组成型表达，无需诱导

5'测序引物: pFastbac-F: TATTCCGGATTATTCATACC

3'测序引物: pFastBac-R: ACAAATGTGGTATGGCTGA

备注: 可表达GST融合蛋白

质粒简介

The Bac-to-Bac® Baculovirus Expression System provides a rapid and efficient method to generate recombinant baculoviruses (Ciccarone et al., 1997). This method was developed by researchers at Monsanto, and is based on site-specific transposition of an expression cassette into a baculovirus shuttle vector (bacmid) propagated in E. coli (Luckow et al., 1993). The major components of the Bac-to-Bac® Baculovirus Expression System include:

• A choice of pFastBac™ donor plasmids that allow generation of an expression construct containing the gene of interest where expression of the gene of interest is controlled by a baculovirus-specific promoter.

• An E. coli host strain, DH10Bac™, that contains a baculovirus shuttle vector (bacmid) and a helper plasmid, and allows generation of a recombinant bacmid following transposition of the pFastBac™ expression construct.. .

质粒图谱

扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl 无菌水溶解质粒；
②取2μl质粒加至100μl 感受态中，冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）

③加入500μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；

④取10μl、100μl复苏液，并分别涂布至目标质粒抗性的LB平板上；
（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）

⑤将平板正向培养1h，再倒置37度培养16h。如果要求是30度则培养20h；
（如果菌落过多，请将质粒稀释后再转化。如果无菌落，请加入10μl质粒离心全涂转化）

⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

2、甘油菌：四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。

3、穿刺菌：穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。

4、平板：直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒：单独提取的液体质粒收到后可直接使用。

生化试剂 pFastBac-GST-C昆虫胞内质粒由上海钦胜生物科技有限公司为您提供，如想了解更多关于生物分子 pFastBac-GST-C昆虫胞内质粒的报价、规格、厂家等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应pFastBac-GST-C昆虫胞内质粒外，上海钦胜生物科技有限公司还可为您提供：

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