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仪器信息网试剂标物生化试剂生物分子 pRS403酿酒酵母质粒

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上海钦胜生物科技有限公司

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pRS403酿酒酵母质粒

价格：￥ 980

品牌：钦胜生物

供货周期：现货

货号：QSP0225

规格：2UG

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pRS403酿酒酵母质粒

基本信息

复制子: pUC ori，FI ori

质粒分类: 酵母系列质粒；酵母表达质粒；酿酒酵母质粒

质粒大小: 4456bp

原核抗性: 氨苄青霉素Amp（100μg/ml）

筛选标记: HIS3

克隆菌株: DH5α等大肠杆菌

培养条件: 37℃，有氧 LB

表达宿主: YPH499，YPH500等酿酒酵母

培养条件: 30℃，YPD，有氧

5'测序引物: T7(TAATACGACTCACTATAGGG)

3'测序引物: M13R(CAGGAAACAGCTATGACC)

质粒简介

pRS4xx系列质粒被用于基因的穿梭载体克隆酿酒酵母，但能够在大肠杆菌中复制。虽然在大肠杆菌中，他们从pMB1的复制原点复制至pBR322。他们携带的bla（APR）标记用于选择用氨苄青霉素和复制的噬菌体F1原点单链DNA 。pRS403 through pRS406 are integrative plasmids (YIp); pRS413through pRS416 (shown below) are centromeric plasmids (YCp),and differ from the YIp by the insertion of a centromere (CEN)and autonomously replicating sequence (ARS); pRS423 throughpRS426 are episomal plasmids (YEp), and carry instead theorigin of replication from the yeast 2μ circle plasmid along withREP3 and FRT sequences (2). The 4 vectors in each series differonly in the yeast auxotrophic marker used: HIS3 (pRS4x3), TRP1(pRS4x4), LEU2 (pRS4x5) or URA3 (pRS4x6).

质粒图谱

扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl 无菌水溶解质粒；
②取2μl质粒加至100μl 感受态中，冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）

③加入500μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；

④取10μl、100μl复苏液，并分别涂布至目标质粒抗性的LB平板上；
（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）

⑤将平板正向培养1h，再倒置37度培养16h。如果要求是30度则培养20h；
（如果菌落过多，请将质粒稀释后再转化。如果无菌落，请加入10μl质粒离心全涂转化）

⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

2、甘油菌：四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。

3、穿刺菌：穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。

4、平板：直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒：单独提取的液体质粒收到后可直接使用。

生化试剂 pRS403酿酒酵母质粒由上海钦胜生物科技有限公司为您提供，如想了解更多关于生物分子 pRS403酿酒酵母质粒的报价、规格、厂家等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应pRS403酿酒酵母质粒外，上海钦胜生物科技有限公司还可为您提供：

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