供应商免费入驻

仪器信息网试剂标物生化试剂生物分子 pBeloBAC11细菌人工染色体质粒(单拷贝)

耗材通第 2 年

上海钦胜生物科技有限公司

认证：工商信息已核实

厂商展位

找不到产品？留下需求帮您找

一键询价

pBeloBAC11细菌人工染色体质粒(单拷贝)

价格：￥ 980

品牌：钦胜生物

供货周期：现货

货号：QSP0908

规格：2UG

一键咨询

获取电话

详细信息

详细信息

pBeloBAC11细菌人工染色体质粒(单拷贝)

基本信息

复制子: OriS

质粒大小: 7507bp

原核抗性: 氯霉素Chl

克隆菌株: 大肠杆菌DH5α

培养条件: 37℃，有氧，LB

备注: 细菌人工染色体BAC质粒

质粒简介

随着基因组学时代的到来，克隆并利用生物的重要基因，研究这些基因的结构、功能和进化已成为遗传学领域的热点之一。生物体的许多重要性状都涉及到复杂的生理生化反应，受多基因或基因簇的控制，与成百上万碱基的DNA片段相关，此外，复杂基因组的物理作图和基因的图位克隆也涉及到大片段的研究，因此提高载体的容纳量一直是克隆载体的重要发展方向之一。

目前比较理想的细菌人工染色体（Bacterial artificial chromosome，BAC）是指一种以F质粒（F-plasmid）为基础建构而成的细菌染色体克隆载体，命名为pBACs，其容量在50 - 300 kb之间，各种类型的pBACs在大肠杆菌都呈单拷贝。

BAC是以大肠杆菌致育因子（F因子）为基础的合成载体。F因子也称为F质粒，是一种“性质粒”，它可将宿主当然体基因转移到另一宿主细胞。F因子在大肠杆菌中的复制受到严格控制而保持低拷贝，一般为每个细胞1-2个拷贝，其parB基因能够排斥细胞中的外源性F质粒，限制了细胞内质粒分子间的重排，降低了重组BAC中外源DNA的重排水平和嵌合度。此外，F因子具有携带1M bp插入片段的潜能，这就使构具有大容量克隆能力的BAC载体成为可能。

BAC载体主要包括oriS，repE(控制F质粒复制）和parA、parB（控制拷贝数）等元件。以BAC为基础克隆的载体成嵌合体的频率较低，转化效率高，而且以环状结构存在于细菌体内，易于分离纯化，已被科学界广泛接受。目前主要用于大片段基因组文库的构建和大的基因簇（gene cluster）的相关研究，在各类生物基因组计划中发挥重要作用。

质粒图谱

扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉（请务必转化挑单克隆重提后使用）
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl 无菌水溶解质粒；
②取2μl质粒加至100μl 感受态中，冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）

③加入500μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；

④取10μl、100μl复苏液，并分别涂布至目标质粒抗性的LB平板上；
（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）

⑤将平板正向培养1h，再倒置37度培养16h。如果要求是30度则培养20h；
（如果菌落过多，请将质粒稀释后再转化。如果无菌落，请加入10μl质粒离心全涂转化）

⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

2、甘油菌：四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。

3、穿刺菌：穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。

4、平板：直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒：单独提取的液体质粒收到后可直接使用。

生化试剂 pBeloBAC11细菌人工染色体质粒(单拷贝)由上海钦胜生物科技有限公司为您提供，如想了解更多关于生物分子 pBeloBAC11细菌人工染色体质粒(单拷贝)的报价、规格、厂家等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应pBeloBAC11细菌人工染色体质粒(单拷贝)外，上海钦胜生物科技有限公司还可为您提供：

推荐专场