人食管上皮细胞
人食管上皮细胞详述
食管是咽和胃之间的消化管,哺乳动物的食管结构上由内向外分四层:黏膜层、黏膜下层、肌层、外膜。其中上皮细胞主要在黏膜层,其上皮为较厚的未角化的复层扁平上皮,耐摩擦,有保护作用。在发育过程中,食管的上皮细胞增殖,由单层变为复层,使管腔变狭窄,甚至一度闭锁,以后管腔又重新出现。在食管与胃贲门交界处,复层扁平上皮突然变成单层柱状上皮。
食管损伤、从而导致食管长期的慢性炎症、溃疡,或慢性刺激,进而食管上皮增生,最后导致癌变。实验证明,弥漫性或局灶性上皮增生可能是食管癌的癌前期病变。在食管癌的发生中,上皮-间质转化( EMT)是上皮细胞来源的恶性肿瘤细胞获得迁移和侵袭能力的重要生物学过程,有利于肿瘤转移。
人食管上皮细胞特性
1) 细胞来源于人正常食管组织。
2) 细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于 90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
人食管上皮细胞的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1) 1mL冻存细胞悬液装于 1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存 1个月。
2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过 85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
人食管上皮细胞产品使用
1) 本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3) 本产品未通过用于活体诊断的审核
原代细胞培养中的六个错误做法:
原代细胞培养与细胞株不同,两者在培养过程中的操作方法也不一样。这里对原代细胞操作过程中容易出现的6
个错误及对应方法做一个说明。
1.长时间水浴解冻:
因为原代细胞非常容易受到解冻过程的影响,所以在37℃水浴锅中解冻时,要在水中摆动溶解。在细胞半溶后
(不要等到全部溶解),迅速拿到生物安全柜或超净台中,用1ml的枪,抽出事先准备好的完全培养基打入冻存
管中,然后抽到培养瓶中,反复进行,直至完全溶解。
2.把冻存管的细胞溶解后迅速离心:
如果原代细胞溶解后马上离心,细胞所受的打击可能比DMSO的毒性还要大,不建议采用这个方法。用带有血清
的完全培养基溶解后铺瓶,第二天换液去除DMSO。
3.让原代细胞长满(百分百)瓶(皿、板):
原代细胞长满后,细胞会出现老化。因为原代细胞不是百分百的细胞团,把混入的细胞控制在最小限度非常重
要。建议细胞长到90-95%进行传代
4.传代时用大量的胰蛋白酶处理:
原代细胞传代时,要用低浓度的胰蛋白酶消化,在显微镜下看到细胞开始变圆、脱落后迅速终止胰蛋白酶。建议
采用含10%血清的完全培养基终止或大豆由来的蛋白酶终止剂终止。
5.细胞培养后再冻存:
原代细胞再冻存后,细胞会老化、也可能引起机能变化,所以不建议再冻存。细胞再冻存也是细胞死伤的主要原
因。
6.原代细胞无限增殖:
原代细胞和细胞系不同,增殖能力是有限的。为了防止遗传上的变化,尽快开始做实验。另外,为了防止混入杂
细胞比例的增加,要经常观察细胞形态。
1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒
置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基
的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是
否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故
客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间
隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过
此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
5.客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术售后服务电话:021-61998551,我们随时给予解答。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!