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资源名称产气肠杆菌
种属Enterobacter aerogenes
分离基物痰液
提供形式冻干粉
安全等级1
模式菌株yes
应用领域模式菌株。水质检测,质量控制菌株。
培养方法
培养基营养肉汁琼脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生长条件37℃,好氧。
实验内容:
1.公司产品仅用于科研称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2.干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3.高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4.过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
菌种具有两大功能:
( 1 )公司产品仅用于科研通过灌根可有效防治植物细菌性和真菌性土传病害,同时可使植物叶部的细菌和真菌病害明显减少;
( 2 )对植物具有明显的促生长、增产作用。 多粘类芽孢杆菌对细菌性土传病害 ―― 植物青枯病具有很好的防治效果,在收获后期,对番茄、茄子、辣椒、烟草、马铃薯、罗汉果和生姜青枯病(姜瘟病)的田间防效可达 70 ~ -- %,增产率达 493 %,甚至当对照发病率高达 -- %时防效也是如此。 多粘类 芽孢杆菌 对芋头软腐病、大白菜软腐病、辣椒 根腐病 、花卉根腐病、玉竹根腐病、沙参根腐病、番茄猝倒病、番茄立枯病以及辣椒疫病等土传 病害 也具有较好的防治作用。 此外,多粘类芽孢杆菌对 植物 具有明显的促生长作用,可使田间植株高度比空白对照区增加 10-30cm ;甚至在植物不发青枯病时,也可使植物的产量增加 27.5% ,且增产主要表现为收获前期。
培养及打管说明:
1、安瓿瓶开封:用浸过75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基,滴入安瓿管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液,移植于1-2支建议的培养基试管中,并在建议的条件下培养。
3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在6-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
保藏方法:
1.传代培养保藏法
公司产品仅用于科研又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。
2. 液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
3. 载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5. 冷冻保藏法
可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷冻干燥保藏法
先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。
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