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Site-directed Mutagenesis Kit

Site-directed Mutagenesis Kit

价格: 770

品牌:爱必信

供货周期: 一周

货号:abs60097

规格:10T

公告提醒:爱必信所有产品和服务仅用于科学研究不用于临床应用及其他用途提供产品和服务也不为任何个人提供产品和服务)!

 

产品描述:

产品名称:Site-directed Mutagenesis Kit

描述: 本试剂盒采用反向PCR(Inverse PCR)技术,对含有目标基因的双链环状质粒进行扩增,直接导入突变序列,从而实现单个或多个邻近碱基的突变(mutation)、缺失(deletion)、或插入(insertion)。该技术的原理如右图所示。首先以甲基化的质粒DNA为模板,使用人工合成含有目的突变碱基的引物进行扩增反应,然后用DpnI限制性内切酶消化不含突变的质粒模板,再进行转化和筛选。
    本试剂盒使用的 Enzyme及其配套buffer能够最大限度地保持扩增质粒的保真性,对引物设计的要求相对宽松、灵活,最多可实现21个连续碱基的插入或删除。该方法操作简单快捷,突变阳性率高,严格按说明书操作,6个以下连续碱基的突变率可达90%以上。
    本试剂盒适用于≤6 kb质粒的点突变。对于6 kb以上的质粒,推荐使用我公司的XL Site-directed Mutagenesis Kit(abs60099)。对于非甲基化的质粒(例如从大肠杆菌JM110或SCS110菌株中提取的质粒),可通过转化dam+ 的大肠杆菌菌株(如DH5α、TOP10、JM109、XL1-Blue等),再抽提获得甲基化的质粒作为PCR反应模板。
    本试剂盒提供一个4.5 kb、含有突变的lacZ基因的对照质粒(Control Plasmid)。质粒转化大肠杆菌后在含Amp、IPTG和X-gal的琼脂平板上呈白色菌落;采用试剂盒提供的Control Primers成功进行突变反应后,菌落呈现蓝色,可据此检测突变效率。
产品信息:

组分 规格
Enzyme 8ul
10 x  Reaction Buffer 100ul
High-GC Additive 30ul
dNTPs 25ul
Dpn I (10 U/ul) 12ul
Control Plasmid (5 ng/ul) 10ul
Control Primers (10 uM of each) 10ul
ddH2O 1ml

注意:除Buffer和ddH2O外,其他组分使用前请先短暂离心;10 x  Reaction Buffer使用前请完全解冻并充分混匀。

储存/保存方法: -20℃保存,保质期12个月。

产品信息订购:

  产品货号   产品名称   规格 价格 大包装及货期
  abs60097   Site-directed Mutagenesis Kit   10T   770.00   立即咨询

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