供应商免费入驻

仪器信息网试剂标物生化试剂生物分子 DH10BAC 感受态细胞

仪信通第 2 年

爱必信(上海)生物科技有限公司

认证：工商信息已核实

厂商展位

找不到产品？留下需求帮您找

一键询价

DH10BAC 感受态细胞

价格：￥ 420

品牌：爱必信

供货周期：一周

货号：abs60049

规格：20×100ul

一键咨询

获取电话

详细信息

详细信息

公告提醒：爱必信所有产品和服务仅用于科学研究，不用于临床应用及其他用途提供产品和服务（也不为任何个人提供产品和服务）!

产品描述：

产品名称：DH10BAC 感受态细胞

描述: 大肠杆菌DH10Bac感受态细胞，适用于昆虫杆状病毒Bac-to-Bac系统中同源重组的菌株，用于产生重组Bacmid。是经特殊工艺制备，使用pUC19质粒检测，转化效率可达107 cfu/μg，-70℃保存几个月转化效率不发生改变。
基因型：
F-mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15ΔlacX74recA1endA1araD139Δ(ara,leu)7697galUgalKλ-rpsLnupG/pMON14272/pMON7124
产品特点：
DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124 亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域，该区域提供了 mini-Tn7从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒（pFastBac1，pFastBacDual等）含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂，Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后，发生重组后就可产生重组 Bacmid，提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外，DH10Bac细胞中的The φ80dlacZΔM15基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象，用于重组Bacmid的蓝白斑筛选。

使用方法: 提示： 1、感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免降低感受态细胞的转化效率。 2、制备含下面抗生素的 LB 固体平板： 50μg/ml kanamycin、7μg/ml gentamicin、10μg/ml tetracycline、100μg/ml X-gal、40μg/ml IPTG。操作： 1、取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中，置于冰浴中。（一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100μl，可以根据实际情况分装使用。应注意所用 DNA 体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。)以下实验以 100μl 感受态细胞为例。 2、向感受态细胞悬液中加入 1-10ng 重组质粒，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置 30 分钟。 3、将离心管置于 42℃水浴中放置 90 秒，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却 2 分钟，该过程不要摇动离心管。 4、向每个离心管中加入 900μl 无菌的 SOC（不含抗生素），混匀后置于 37℃ ,200rpm，摇床振荡培养 4 小时。 5、用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释，如分成 3 个稀释梯度 10-1，10-2，10-3。 6、取 100ul 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板，37℃培养 24-48 小时。 7、保留剩余的菌液于 4℃冰箱中，视平板上菌落生长情况决定去留。相关试剂及培养基的制备方法： 1、LB 液体培养基：称取 10g Tryptone，5g Yeast Extract 和 10g NaCl 置于 1L 烧杯中。加入约 800ml 的去离子水，完全溶解后用 2mol/L 的 NaOH 溶液调节 pH 值至 7.0。加去离子水定容至 1L。分装后，121℃高压灭菌 20 分钟。 2、SOB和SOC 培养基：称取 20g Tryptone，5g Yeast Extract，0.5g NaCl 置于 1L 烧杯中加入约 800ml 的去离子水，完全溶解后再补加 10ml 250mM KCl 溶液，滴加 5M NaOH（约 0.2ml）调 pH 至 7.0。加入去离子水将培养基定容至 1L。121℃灭菌 20 分钟。使用时加入5ml 灭菌的 2M MgCl2溶液（此种培养基称为 SOB）。再补加经 0.22μm 过滤除菌的 1M 葡萄糖溶液2ml（此种培养基为 SOC）。 3、转化复苏细菌用的液体 LB 培养基或 SOC 培养基：可以一次高压 50ml 液体培养基，无菌状态按 1ml 每管分装于高压灭菌的 1.5ml 离心管中，装于自封袋中，冻存于-20℃中，每次用一支。可以极大地避免培养基污染和减少劳动量。 4、LB 固体选择培养基：100ml LB 液体培养基中加入 1.5g 琼脂粉，摇匀后，121℃高压灭菌 20 分钟。冷却至 50℃左右时加入相应浓度的抗生素（如 AMP 浓度通常为100μg/ml），混匀后倒在细菌用的无菌培养皿中，等琼脂凝固后即可使用。 5、IPTG：称量 1.9g IPTG（MW=238.31）充分溶解于 40ml 灭菌水，浓度为200mmol/L。用无菌0.22μm 过滤膜过滤除菌。小份分装后，-20℃保存。 6、 X-gal：用 DMF（二甲基甲酰胺）配制成 20mg/ml，小份分装（1ml/份）后，-20℃避光保存。

储存/保存方法: -70℃保存，避免反复冻融

产品信息订购：

产品货号	产品名称	规格	价格	大包装及货期
abs60049	DH10BAC 感受态细胞	20×100ul	420.00	立即咨询

产品更多信息请进入爱必信网站咨询

生化试剂 DH10BAC 感受态细胞由爱必信(上海)生物科技有限公司为您提供，如想了解更多关于生物分子 DH10BAC 感受态细胞的报价、规格、厂家等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应DH10BAC 感受态细胞外，爱必信(上海)生物科技有限公司还可为您提供：

推荐专场