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公告提醒:爱必信所有产品和服务仅用于科学研究,不用于临床应用及其他用途提供产品和服务(也不为任何个人提供产品和服务)!
产品描述: 产品名称:石蜡组织基因组DNA快速提取试剂盒 描述: 本试剂盒采用独特的脱蜡方法,不含二甲苯,无刺激性气味,对人体无毒无害。独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。
使用方法: 提示: 第一次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇,充分混匀,加入 后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入! 脱蜡方法一: 1、将组织切片 4-5 片,装入到 2ml EP 管中,加入 1.5mlSLI 液,充分振荡。 2、65℃水浴 30 min,再次充分混匀,12000rpm,4℃离心 15 min。 3、弃上清,再加入 1mlSLI 液,按以上步骤重复 2-3 次。 4、沉淀(组织)加入 200ul 裂解液 TL 和 1mlSLⅡ溶液,加入 20-50ul 蛋白酶 K,56℃ 水浴过夜。 5、观察组织消化情况,如还有组织未完全消化,加入 10-20ul 蛋白酶 K,56℃水浴 10-20 min 或直至组织消化完全(期间可用涡旋充分振荡混匀加速组织消化)。 脱蜡方法二: 组织切片(10μm)2~4 张,装入 1.5ml 的灭菌 Ep 管中,加入 1 ml 二甲苯,充分 混匀 1 0 sec,全速离心 2 min,弃上清。加入 1 ml 无水乙醇,充分混匀,离心 12,000rpm 2 min,弃上清。打开 Ep 管,室温(15~25℃)下或 37℃孵育 10 min,直到残余的乙醇 全部挥发。(方法二中所需试剂本试剂盒不提供) 1、加入 200μl 结合液 CB,立刻涡旋振荡充分混匀,在 70℃放置 10 min。 2、冷却后加入 200μl 无水乙醇,立刻涡旋振荡充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀。 3、将上一步混合物(包括可能有的沉淀)加入一个吸附柱 AC 中,(吸附柱放入收集管 中)12,000rpm 离心 1 min,倒掉收集管中的废液。 4、加入 500μl 抑制物去除液 IR,12,000rpm 离心 30 sec,弃废液。 5、加入 500μl 漂洗液 WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心 30 sec, 弃掉废液。 6、重复操作步骤 5。 7、将吸附柱 AC 放回空收集管中,12,000rpm 离心 2 min,将吸附柱置于室温放置数分 钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。 8、取出吸附柱 AC,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部位加 30-100μl 洗脱缓 冲液EB(洗脱缓冲液事先在65℃水浴中预热效果更好),室温放置3-5 min,12,000rpm 离心 1 min。为了增加 DNA 的回收率,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,室温 放置 2 min,12,000rpm 离心 1 min。 (注意:DNA 产物应保存在-20℃,以防 DNA 降解) 储存/保存方法: 室温保存,有效期12个月。 注意事项: 1、结合液 CB 或者抑制物去除液 IR 低温时可能出现析出和沉淀,可以在 37℃水浴几分 钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
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