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BCA 蛋白定量试剂盒(增强型)

BCA 蛋白定量试剂盒(增强型)

价格: 510

品牌:爱必信

供货周期: 一周

货号:abs9233

规格:500次

公告提醒:爱必信所有产品和服务仅用于科学研究不用于临床应用及其他用途提供产品和服务也不为任何个人提供产品和服务)!

 

产品描述:

产品名称:BCA 蛋白定量试剂盒(增强型)

描述:

BCA法是理想的蛋白质定量方法,在碱性环境下蛋白质分子中肽键结构与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。BCA特异地与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物,在562nm处有最大的光吸收值并与蛋白质浓度成正比,颜色的深浅与蛋白质的含量成正比,可以根据吸收值测定蛋白质浓度。该测定方法灵敏度高,操作简单,试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳,并且受干扰物质去垢剂等影响小。
 
产品特点:
1、准确灵敏,线性范围广,BCA试剂的蛋白质测定范围是0.5~30ug/mL;
2、快速:45min内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便;
3、不受样品中离子型和非离子型去污剂影响;
4、检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝,可以酶标板法或分光光度计法测定蛋白质浓度。
 
组分:
品名 包装
BCA蛋白定量A1液 50mL
BCA蛋白定量A2液 50mL
BCA蛋白定量B液 4mL
5mg/mL BSA 1mL

储存/保存方法: BCA蛋白定量试剂盒A、B应保存于2~8℃;5mg/mL BSA应保存于-20℃。

使用方法: 实验流程: 1、BSA 标准品的稀释: (1)取 20uL 5mg/mL BSA 标准品稀释至 1000uL,使其终浓度为 100ug/mL。蛋白样品在什么 溶液中溶解,BSA 应用相应的溶液稀释。通常情况下,为了方便,可用蒸馏水稀释。 (2)在 96 孔板中分别加入 0、7.5、15、30、45uL 稀释后的标准品(100ug/mL BSA),再分 别加入 150、142.5、135、120、105uL 蒸馏水,每孔总体积为 150uL。建议每种浓度做 2~3 个复孔。 2、BCA 工作液的准备: (1)按下列公式计算所需要的 BCA 工作液体积; (标准曲线+未知样品个数)×(重复次数)×(每个样品所需的 BCA 工作液体积)=所需要 BCA 工作液的总体积 例如:需要测定标准曲线和 3 个样品的蛋白浓度,每个实验重复 2 次,每次实验需要 150uL 工作液:(5 个标准曲线点+ 3 个样品) × (2 次重复) × (0.15mL) = 2.4mL 工作液 (2)将 25 份 A1 液、25 份 A2 液与 1 份 B 液混合后得到工作液。 例如需要 5.1mL 工作液,取 2.5mL A1 液+2.5mL A2 液+0.1mL B 液,混合既得。 注意:当 B 液加入 A1、A2 液时,可看见浊度,轻轻晃动后消失,工作液为绿色。 3、样品检测 在 96 孔板中加入适当体积的样品,用蒸馏水将样品体积补至 150uL。 4、在各孔(标准曲线孔和样品孔)中分别加入 150uL BCA 工作液,60℃孵育 60min; 5、在 562nm 处测其吸光度值,绘制标准曲线。 6、根据标准曲线计算蛋白浓度。

注意事项: 1、将 A1、A2、B 液恢复到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度。若液体出现物质析出,请室温平衡后,轻轻晃动,使其溶解后再使用。
2、蛋白标准请混匀后,再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。
3、请尽量使得待测样品蛋白的浓度在 0.5~30ug/mL 之间。
4、需酶标仪一台,最佳检测波长为 562nm,并需 96 孔板。

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