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小鼠骨髓树突状细胞(DC细胞)我们公司多年来致力于生化试剂、抗体、细胞和原代细胞等的研发与生产,我们期待与您更加密切的合作,集合作伙伴之力以达到双赢。我们始终坚持初心,愿做科研行业的一股清流,让用户对我公司的产品品质和服务有更全面的了解。我们的团队会一直努力,让“酶联生物”成为一家受人尊敬的企业!
细胞名称:小鼠骨髓树突状细胞(DC细胞)
种属来源:小鼠
组织来源:实验动物的正常骨髓组织
疾病特征:正常原代细胞
细胞形态:不规则细胞
生长特性:半贴壁半悬浮培养
RPMI-1640、FBS、树突状细胞诱导添加剂、Glutamine、Penicillin、
Streptomycin等。
培 养 基:我们推荐使用EliteCell原代DC细胞培养体系作为体外培养原代DC细胞的培养基。
生长条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃,
传代方法:1:2至1:6,每周2次。
冻存条件:90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存
细胞鉴定:CD11c免疫荧光染色为阳性,经鉴定细胞纯度高于90%。
QC检 测:不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
特点和简介
树突状细胞(Dendritic cells, DC)是机体功能最强的专职抗原递呈细胞,它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原,未成熟DC具有较强的迁移能力,成熟DC能有效激活初始型T细胞,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。
DC的来源有两条途径:①髓样干细胞在GM-CSF的刺激下分化为DC,称为髓样DC,也称DCl,与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞;包括朗格汉斯细胞,间皮DCs以及单核细胞衍生的DCs等,②来源于淋巴样干细胞,称为淋巴样DC或浆细胞样DC,即DC2,与T细胞和NK细胞有共同的前体细胞。树突状细胞(DC)表面具有丰富的抗原递呈分子、共刺激因子和粘附因子,是功能强大的专职抗原递呈细胞(APC)。DC自身具有免疫刺激能力,是目前发现的惟一能激活未致敏的初始型T细胞的APC。
小鼠骨髓树突状细胞分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓DC细胞是由骨髓单核细胞诱导而成的;DC细胞,全称树突状细胞(DC),是近年来倍受们关注的专职抗原呈递细胞(APC),能摄取、加工及呈递抗原,启动T细胞介导的免疫反应。由美国学者Steinman于1973年首次在淋巴结中发现,从脾脏中分离出一类与粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞形态和功都不同的白细胞,因其细胞膜向外伸出,形成与神经细胞轴突相似的膜性树状突起,故而命名为树突状细胞。未成熟DC具有较强的迁移能力,成熟DC能有效激活初始型T细胞,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。
本公司生产的小鼠骨髓DC细胞采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞纯度可达85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
接受后处理
1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 仅供科研使用小鼠骨髓树突状细胞(DC细胞)。
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