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幼兔肺成纤维样细胞规格

幼兔肺成纤维样细胞规格

价格: 面议

品牌:ATCC

供货周期: 现货

货号:CS-X8300

规格:详见说明书

公司产品采用干冰运输,经过逐步的降温,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暂时停止其生命活动,保存其活性,使您的实验更生动,公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等国际品牌.

产品名称

生长特性

货号

幼兔肺成纤维样细胞规格

贴壁生长

CS-X8300

细胞名称 幼兔肺成纤维样细胞

形态特性  成纤维样细胞

生长特性 贴壁生长

特征特性  该细胞系来源于一出生三天的幼兔的正常肺组织。2014年由中科院昆明细胞库建立。

培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10FBS

传代方法  1:2传代;3-4天一次

传代情况 P2

冻存条件  基础培养基+5DMSO+20FBS

QQ截图20200325110029.jpg细胞培养步骤:

一.幼兔肺成纤维样细胞规格培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备DMEM-H培养基(GIBCO,货号1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根据实验需要选择悬浮培养基,使293T细胞悬浮生长。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。

以下是公司正在热销的产品:

phospho-beta catenin (Tyr142) 英文名称: 磷酸化β 连环素蛋白抗体 0.1ml

Anti-TETRODOTOXIN ( TTX ) 河素抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml

PROGR ELISA kit 大鼠孕酮受体Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-Synapsin II 神经突触素2抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗豚鼠IgG 规格 0.1ml

SP(Mouse Substance P) ELISA Kit 小鼠P物质 96T

NEDD4 英文名称: 神经前体细胞发育下调蛋白4抗体 0.2ml
幼兔肺成纤维样细胞规格Rhesus antibody Rh Phospho-NFKBIB (Ser23) 磷酸化KB抑制蛋白β抗体 规格 0.1ml

ADRB3/ Beta3-AR ( Beta3-adrenergic receptor) 肾上腺素能受体β3Multi-class antibodies规格: 0.5mg

BMP-2 大鼠骨形成蛋白-2Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-EF1 Alpha 延伸因子EF-1a抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml

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C3SP(Human Complement 3 split product) ELISA Kit 人补体3裂解产物 96T

phospho-DOK1 (Ser450) 英文名称: 磷酸化D酪酸激酶衰减蛋白1抗体 0.1ml
操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

 





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