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仪器信息网试剂标物生化试剂生物分子抗鼠CD4单克隆细胞；YTA 3.1.2说明书

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上海莼试生物技术有限公司

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抗鼠CD4单克隆细胞；YTA 3.1.2说明书

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品牌：ATCC

供货周期：现货

货号：CS-X7449

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抗鼠CD4单克隆细胞；YTA 3.1.2说明书运输保存：采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经完全融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按指定条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。

细胞名称抗鼠CD4单克隆细胞；YTA 3.1.2

形态特性淋巴母细胞样

生长特性半贴壁生长

特征特性该细胞分佖CD4不同抗原决定簇单抗，用于CD4单抗的制备。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10FBS　

传代方法 1:3传代,2-3天传一代

传代情况 C3

冻存条件基础培养基+5DMSO+20FBS　　

产品名称	抗鼠CD4单克隆细胞；YTA 3.1.2说明书
生长特性	贴壁生长
货号	CS-X7449

细胞培养操作规程：

主要功能：

（1）血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。

（2）表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1，参与血管壁的炎症反应。

（3）与血管疾病的进展和稳定有关。

生理变化：

（1）主动脉硬化。

（2）主动脉瘤

（3）主动脉钙化。

一般培养方法:

1、组织块培养法

A）按照前述方法取材，将组织剪成或切成1mm3大小的小块，并加入少许培养基使组织湿润。

B）将小块均匀涂布于瓶壁，每小块间距0.2 cm～12.5px，一般在25mL培养瓶（底面积为437.5px2）可接种20～30小块为宜，小块放置后，轻轻翻转培养瓶，使瓶底朝上，然后于瓶内加入适量培养基盖好瓶塞，将瓶倾斜放置在37℃温箱内。

C）培养2～4小时，待小块贴附后，将培养瓶缓慢翻转平放，静置培养，动作要轻，严禁摇动和来回振荡，以抗鼠CD4单克隆细胞；YTA 3.1.2说明书防由于冲动而使小块漂起而造成培养失败，若组织块不易贴壁可预先在瓶壁涂一薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。开始培养时培养基不宜多，以保持组织块湿润即可，培养24小时后再补液，培养初期移动和观察时要轻拿轻放，开始几天尽量不去搬动，以利贴壁和生长，培养3～5天时可换液，一方面补充营养，一方面去除代谢产物和漂浮小块所产生的毒性作用。

2、消化培养法

该方法是采用前述的消化分散法，将妨碍细胞生长的细胞间质（包括基质、纤维等）去除，使细胞分散形成细胞悬液，然后分瓶培养。

3、悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

培养操作：

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆脱落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取

CCDC52 英文名称：卷曲螺旋结构域蛋白52抗体 0.2ml

Anti-Phospho-FLT3 (Tyr591) 磷酸化FMS样酪氨酸激酶3Multi-class antibodies规格： 0.1ml

mouse Caspase-8 小鼠Caspase-8Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-FLT3 (Tyr589/591) 磷酸化FMS样酪氨酸激酶3Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/PE PE标记的小鼠抗兔IgG 规格 0.1ml

LPA(Human L-phenylalanine) ELISA Kit 人苯丙酸 96T

Phospho-Smad1 (Ser463) 英文名称：磷酸化细胞信号转导分子Smad-1抗体 0.1ml
抗鼠CD4单克隆细胞；YTA 3.1.2说明书HGF human 人肝生素Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Collagen III 抗Ⅲ型胶原抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh nonstructural protein 1/NS1 A型流感病毒-NS1抗体(神经氨酸酶1) 规格 0.2ml

Human myelin basic protein,MBP ELISA Kit 人髓磷脂碱性蛋白 96T

Triosephosphate isomerase 英文名称：磷酸丙糖异构酶抗体 0.2ml

phospho-CXCR2 (Ser347) 英文名称：磷酸化细胞表面趋化因子受体2抗体 0.2ml

Anti-Collagen III 抗Ⅲ型胶原抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

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