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以下是PCR检测试剂盒的订购信息:
产品名称 | 规格 | 分类 |
拟态弧菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法) | 48T | 恒温荧光法 |
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
拟态弧菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
97%25g25g粘蛋白RetinoschisinBR,98%97%25gCOL1A1
98%500g5g粘蛋白Amyloid beta A4 proteinBR,98%98%500gTyr705
CP,98%100g100ml粘蛋白Amyloid Beta Precursor Like Protein 2AR,99.5%CP,98%100gα2-MG
98%25g25ml粘蛋白Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor Receptor Alpha 1AR,99.5%98%25gSERPINA5
分子量~5000500g25g蛋白保护剂TYCHRM2AR,99.5%分子量~5000500gEP
分子量~100001g5g琼脂糖蛋白ACollagenase IAR,88%分子量~100001gCyr61;CCN1
β相,99.9% metals basis25g1ml琼脂糖蛋白ACollagenase ⅢAR,88%β相,99.9% metals basis25gack
99.5% metals basis,5 μm5g5ml金属蛋白 混合体Dopamine receptor antibodyAR,88%99.5% metals basis,5 μm5gPTA
99.5% metals basis,5 μm1g25g金属蛋白(I型)microtubule-associated protein 1 light chain 3BR,98%99.5% metals basis,5 μm1gMMD
CP,98%5g5g金属蛋白(II型)ADP-ribosylationfactor IP2BR,98%CP,98%5gSCOT
拟态弧菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)98%25g250mg过酸铵溶液(AP,10%)c-fosBR,99%,分子量10000,粉末98%25gUGT1
98%100g100gTEMEDCytcAR,98.5%98%100gUGT2
TEMEDsoluble vascular endothelial growth factor特纯,95%98%100gUCR
40%溶液500g100g溴酚蓝水溶液(1%)Vascular Endothelial cell Growth Factor165特纯,95%40%溶液500guPA
≥98%1g25g溴酚蓝水溶液(2%)Rab-11A98%≥98%1gUCN2
96%25g5g酸盐-SDS电泳缓冲液(4×)Der p IgG498%96%25gUCN3
96%5g100gCL蛋白酶抑制剂混合液(1mg/ml)TSH alpha subunit98%96%5gBUN
苯甲基磺酰氟溶液(PMSF,100mmol/L)FAT tumor suppressor homolog 1AR,99%98%100gUA
98%100g5g苯甲基磺酰氟溶液(PMSF,100mmol/L)ArginineCP,99%98%100gUMOD
99%500g100g苯甲基磺酰氟溶液(PMSF,100mmol/L)Testosterone RecipientAR,99.5%99%500gUrM;UMOD
PCR反应五要素:
拟态弧菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。