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锦鲤疱疹病毒(KHV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

锦鲤疱疹病毒(KHV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

价格: 2499

品牌:PCRmax

供货周期: 现货

货号:CP913957

型号:48T

产品运输:低温运输

产品保存:-20℃保存

产品有效期:一年

储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。

运输:低温、避光,快递免费送货上门。

以下是PCR检测试剂盒的订购信息:

产品名称

规格

分类

锦鲤疱疹病毒(KHV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

48T

恒温荧光法

B1520996179917afp9z6r44ypng_small.jpg 

使用及效果:

PCR反应特点

(1) 特异性强

PCR反应的特异性决定因素为:

①引物与模板DNA特异正确的结合;

②碱基配对原则;

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;

④靶基因的特异性与保守性。

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。

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锦鲤疱疹病毒(KHV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论

PCR反应五要素: 

锦鲤疱疹病毒(KHV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。

设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
97%25g5g4-硝基苯基-α-D-吡喃甘露糖苷centromere proteinsAR,95%97%25gγ-GCS

97%500g1g4-硝基苯基-α-D-吡喃甘露糖苷Lupus anticoagulant IgG antibodyAR,95%97%500gNQO

98%100g5g5'-二酸葡萄糖腺苷二钠盐Lupus anticoagulant IgM antibodyAR,99%98%100gTTN

≥98%25g100g5'-二酸葡萄糖腺苷二钠盐SREBPcleavage-activating protein antibodyAR,99%≥98%25gCYP8β

≥98%500g25g1,5二酸核酮糖IKKαAR,99%≥98%500gKGDHC

97%100g100g1,5二酸核酮糖IKKβAR,99%97%100gOGN

97%500g25g阿卡波糖SREBPcleavage-activating proteinAR,99%97%500gMCP-IgM

98%100mg25g阿卡波糖CD3,CD4, CD8BR,95%98%100mgHO

98%500mg100g阿卡波糖HLA-CW7BR,95%98%500mgEDHF

99%50mg25g甲基-β-D-葡糖苷Neuron-specific enolaseBR,95%99%50mgNa-K-ATPase

锦鲤疱疹病毒(KHV)核酸检测试剂盒(恒温荧光法)99%5g1g核酸沉淀溶液(TCA法)Recombinant Endoplasmic Reticulum To Nucleus Signalling 1BR,98%99%5gHSL

99%1g5g核酸沉淀溶液(焦酸钠法)typhoid AntigenBR,99%99%1gKLK 1

97%5g100mg溶菌酶(Lysozyme,10mg/ml)Anti acid phosphatase 5bBR,99%97%5gVLDL

97%100mg10mg葡萄糖-Tris-EDTA溶液(GTE)Parathyroid hormone134BR,80%97%100mgVLDL-C

98%500mg25mg哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒N-Terminal Pro-Atrial Natriuretic PeptideBR,80%98%500mgHK

核酸助沉剂(Glycogen,5mg/ml)Coiled Coil Domain Containing Protein 49BR,98%98%25gHK2

≥97%5g5g核酸助沉剂(Glycogen,5mg/ml)pyruvate dehydrogenaseBR,98%≥97%5gMTX

≥97%1g1g核酸助沉剂(Glycogen,20mg/ml)indoxylsulfateBR,98%≥97%1gMECP2

98%500mg5g原生质体缓冲液Same type of cysteineBR,98%98%500mgYKL-40

95%5g1gBLOTTO溶液3-carboxy-4-methyl-5-propyl-2-furanpropionic acidBR,98%95%5gMSRB1

 





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