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霍乱弧菌O139型核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

霍乱弧菌O139型核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

价格: 2499

品牌:PCRmax

供货周期: 现货

货号:CP913930

规格:48T

产品规格:48T

产品运输:低温运输

产品保存:-20℃保存

产品有效期:一年

储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。

运输:低温、避光,快递免费送货上门。

以下是PCR检测试剂盒的订购信息:

产品名称

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霍乱弧菌O139型核酸检测试剂盒(恒温荧光法)

详见说明

恒温荧光法

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使用及效果:

PCR反应特点

(1) 特异性强

PCR反应的特异性决定因素为:

①引物与模板DNA特异正确的结合;

②碱基配对原则;

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;

④靶基因的特异性与保守性。

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。

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霍乱弧菌O139型核酸检测试剂盒(恒温荧光法)其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论

PCR反应五要素: 

霍乱弧菌O139型核酸检测试剂盒(恒温荧光法)参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。

设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
99%100g5gD-核糖Y一glutamyl transpeptidaseAR,99%99%100gFLG

99%500g100g2-脱氧-D-核糖GTPase-activating proteinAR,99%99%500gRF-Ab

99%1g25g2-脱氧-D-核糖Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus antibodyBR,95%99%1gUGIGA1

99%5g100g2-脱氧-D-核糖cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagenBR,95%99%5gGd-IgA1

98%1g25g2-脱氧-D-核糖C-telopeptide of type Ⅰ collagen高纯,97%98%1gIgA1

98%25g500g2-脱氧-D-葡萄糖Twinfilin 1高纯,97%98%25gPLTP

95%5g1g2-脱氧-D-葡萄糖Glycoprotein 2高纯,97%95%5gHDL-ApoA1

97%1g5g2-脱氧-D-葡萄糖Melanotransferrin高纯,98%97%1gHDL-SAA

97%25g25gD-甘露糖Big Dynorphin A1-13高纯,98%97%25gHDL-PON1

98%5g5gD-甘露糖secreted frizzled-related protein 4高纯,98%98%5gPON1

霍乱弧菌O139型核酸检测试剂盒(恒温荧光法)98%25g5g碳酸锂饱和水溶液Sucrose Enzyme特纯,99%98%25gIL-33

98%500g25g硝酸银水溶液(5%)Interleukin 39特纯,99%98%500gIL-35

99%100g5g硝酸银水溶液(10%)Gzms-A特纯,99%99%100gIL-38

99%25g100g亚甲基蓝染色液(0.2%)Perforin特纯,99%99%25gIL-4

97%5g25g亚甲基蓝染色液(0.5%)chitotriosidase特纯,99%97%5gIL-5

97%100g1g亚甲基蓝染色液(1%)Dengue virus特纯,99%97%100gIL-6

97%25g5g吕氏碱性美蓝染色液hepatitis B virus特纯,99%97%25gIL-7

97%500g25gTurk溶液Plasma serine protease inhibitorB1特纯,99%97%500gIL-8

97%100g1g乙酸水溶液(1%)angiopoietin-like protein 8特纯,99%97%100gIL-9

97%25g250mg荧光抗体稀释液Glutamate decarboxylase 65 Antibody特纯,99%97%25gHLA-G

 





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