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一步式RT-PCR Mix

一步式RT-PCR Mix

价格: 面议

品牌:PCRmax

供货周期: 现货

货号:CS-G0031

规格:50T

公司提供的RNA/DNA 提取,完善的实验条件,先进的设备,高素质的实验人员,保证您片的实验得以良好的完成。我们承诺一对一的专门服务,您可以全称参与了解实验进程。公司产品仅用于科研
一步式RT-PCR Mix客户提供

●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)

●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)

我们提供:

基因组RNA/DNA提取、实验报告

质量保证

高纯度RNA/DNA、完整货期

3-5个工作日

一步式RT-PCR Mix注意事项:

1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响链的合成,也不影响PCR反应。

2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。

3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。

FasL(抗原)Phospho-ZAP70 (Tyr315 + Tyr319)磷酸化GATA结合蛋白6抗体

Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor)Phospho-ZAP70 (Tyr493)磷酸化γ氨基丁酸γ2受体/GABAA Rγ2抗体

Fe65 protein peptidePhospho-Zyxin (Ser142+Ser143)胰高血糖素受体抗体

FGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1)ZBTB41生长分化因子3抗体

fgL2 (Fibrinogen-like 2)ZIC3磷酸化糖原合酶激酶3β抗体

FLIP S/L peptidezbtb11G蛋白偶联受体1抗体

FoxP3ZBT24G蛋白β1抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β亚基1

GAP-43 ( Growth associated protein-43 )ZA20D3G蛋白β3抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β亚基3
一步式RT-PCR MixCELSR2caspase-3 p12 subunit人李斯特菌抗体(IgM)免疫试剂盒

CHRDL1C7ORF61人李斯特菌抗体(IgG)免疫试剂盒

CHURC1Claudin 11人冷诱导RNA结合蛋白(CIRBP)免疫试剂盒

CRMP3CD80人冷球蛋白(CG)免疫试剂盒

CRSP9C5b-9人类似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 免疫试剂盒

Copine-6C8orf55人类似cDNA顺序BC027382 免疫试剂盒

Cpt1cC4a+C4b人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2 抗体 免疫试剂盒

Factor BCD44v7人类肌腱蛋白c(TNC)免疫试剂盒
一步式RT-PCR Mix使用方法

  1. 取新鲜抗凝血 5 mL,在 10 mL 或 15 mL 的塑料离心管中用红细胞裂解液裂解红细胞(红细胞裂解液有几种配方,用户需要根据所选产品的使用手册进行操作,这里不列出每种的详细步骤),也可以直接 2500 rpm 离心 5 分钟后取白细胞层到一新的 10 mL 或 15 mL 的塑料离心管中。

  2. 在所得的白细胞沉淀中或所得白细胞层溶液中加自备的生理盐水使得白细胞的终体积为 2 mL。

  3. 加 1 mL 的本产品,混匀后 55℃ 保温 3 小时,其间轻轻振摇数次。

  4. 加入 3 mL 自备的 Tris 饱和酚,轻轻震摇 5 分钟,使得水相和酚相充分分开。

  5. 3500 rpm 离心 15 分钟,上层水相含 DNA,中间白色层为蛋白质,下层为酚相。

  6. 将非常粘稠的含 DNA 的上清液转移到一干净的 10 mL 或 15 mL 的塑料离心管中。

  7. 再用 Tris 饱和酚重复上面的抽提步骤,直到离心后中间层没有白色的蛋白出现为止。

  8. 在上清液中加入等体积的自备的氯仿,轻轻震摇 5 分钟,3500 rpm 离心 5分钟,转移上清液到一干净的 10 mL 或 15 mL 的塑料离心管中。此步可以除去残留的酚。

  9. 在上清液中加入 0.1 倍体积的自备的 3 M 乙酸钠溶液(pH 5.2)和 2 倍体积的无水乙醇,轻柔颠倒混匀,将出现絮状的 DNA 沉淀。

  10. 用移液枪头将 DNA 沉淀挑取出来,转移到 1.5 mL 的塑料离心管中,用 75%的乙醇浸泡 2 次。此操作可以去除 DNA 中残留的盐离子。

  11. 转移 DNA 沉淀到一个 1.5 mL 的塑料离心管中,空气中放置 10 分钟左右待乙醇挥发后,加入 0.5 mL 自备的 TE 缓冲液溶解 DNA,4℃放置待用。

 





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