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胰酶细胞消化液
胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA。该消化液经过过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的解离。本制品具有方便快速的特点,通常室温消化1分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。 | ||
储存 | ||
长期保存放置于-20℃,保存2年,一经融化后放置于4℃保存,可放置6个月,避免反复冻融。 | ||
操作方法 | ||
1. 贴壁细胞的消化: a) 吸去培养液,用无菌的PBS洗涤细胞一次,以去除残余的血清。 b) 加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。 c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。 d) 如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。 e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。 2. 组织的消化: 不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。 注意事项 1.在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。 2. 胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。 |