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CCK8细胞增殖与毒性检测试剂
CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测的试剂,因其操作简单快速、高灵敏度且细胞毒性低等成为替代MTT法检测细胞生长密度的好方法。该试剂盒利用水溶性四唑盐-WST?-8在电子载体1-Methoxy PMS存在的情况下能够被还原成水溶性的甲臜染料,生成的甲臜量与活细胞数量成正比。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。 | ||
优势 | ||
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应用 | ||
细胞增殖测定、细胞毒性测定、药物筛选、肿瘤药敏试验 | ||
储存 | ||
-20℃避光可保存2年,融化后 4℃避光放置可保存 1 年。反复冻融会增加背景值。 | ||
注意事项 | ||
1. 接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不等,可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发,为了减少误差,建议培养板的四边每孔只加培养基或PBS,而不作为指标检测孔。 2. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待检测体系中存在较多的还原剂,例如一些抗氧化剂会干扰检测,需设法去除。 3. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。 4. 培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。一般情况下,白细胞较难染色,因此需要较长的培养时间或增加细胞数量 (~105个细胞/孔)。悬浮细胞与贴壁细胞相比较难染色。对于悬浮细胞,在培养1- 4小时后,可先从培养箱中取出,目察染色程度或用酶标仪测定决定。若染色困难,可将培养板放回培养箱,继续培养数小时后再确定。 染色的佳时间可定为悬浮细胞的佳培养时间。对于贴壁细胞,培养时间一般为1-4小时,但在培养30分钟左右即可取出肉眼观察染色程度 (根据细胞种类而定,需要摸索一下条件)。 5. 若细胞培养时间较长,培养基颜色发生变化或 pH发生变化,建议更换新鲜的培养基后再加CCK-8试剂。 |