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T7 核酸内切酶I
T7 核酸内切酶I识别并切割不完全配对 DNA、十字型结构 DNA、Holliday 结构或交叉 DNA、异源双链 DNA 或者以更慢的速度切割含切刻的双链 DNA。T7核酸内切酶I切割错配碱基 5′ 端的一、第二或第三个磷酸二酯。本产品是通过克隆重组表达T7核酸内切酶I基因,获得的高纯度蛋白,该酶无其他内切酶或外切酶污染。 | |
组分 | |
名称数量T7 Endonuclease I (10 U/μl)25 μl/250 μl10X T7 Endonuclease I Buffer1 ml/1 mlx5 | |
单位定义 | |
在 50 μl 反应体系,37℃ 条件下,1 小时将 90% 以上的 1 μg 超螺旋十字型结构的 pUC(AT)* 转化成 90% 以上的线性结构所需要的酶量定义为一个活性单位。 | |
应用 | |
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1X T7 Endonuclease I Buffer | |
50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2 ,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)。 | |
酶保存液 | |
50 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, pH 7.5。 | |
储存 | |
置于-20°C,可保存2年,避免反复冻融。 | |
注意事项 | |
(1) T7 核酸内切酶 I 是一种具有底物结构选择性的酶;该酶以不同的活性作用于不同的 DNA 底物。切割特定底物,必须控制酶量和反应时间。 (2)反应温度超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。 |