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核酸外切酶I(Exonuclease I, E.coli)
核酸外切酶I(Exonuclease I)具有从3’-5’方向降解单链 DNA 的外切酶活性,能够逐步释放脱氧核糖核酸5'单磷酸,并留下完整的5'端二核苷酸。该酶来源于携带有E. coli exo I 基因的质粒,经重组表达纯化而得。Exonuclease I多用于PCR扩增后降解消化引物,该酶对于双链DNA和磷酰或乙酰基团封闭的3’OH末端DNA链无活性。 | |
单位定义 | |
1 单位指在 37℃ 条件下,30 分钟内催化释放 10 nmol 的酸溶性核苷释放所需要的酶量。 | |
组分 | |
名称数量Exonuclease I(20 U/μl)75 μl10×ExoI Buffer1 ml | |
应用 | |
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储存 | |
置于-20°C,可保存3年。 | |
使用注意事项 | |
(1)1×ExoI Buffer:67mM Glycine-KOH pH 9.5,6.7mM MgCl2,10mM 2-巯基乙醇。该酶在常规PCR Buffer中也具有活性。 (2)该酶的佳反应温度为37°C,80°C 20min可失活。 (3)该酶不能切割双链DNA,因此含有二级结构的单链DNA需要变性后才能完全消化。 |