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LAMP-HNB变色扩增试剂盒
LAMP是一种新型核酸扩增技术,采用4或6条能够识别目的基因上的6个特异区域的引物,依赖于Bst DNA聚合酶的强链置换活性,在30~60分钟内DNA扩增可达109~1010倍。 羟基萘酚蓝(HNB)是一种金属离子指示剂,LAMP-HNB的变色原理为:HNB与镁离子结合使得反应体系初始颜色为紫罗兰色,随着反应的进行,Mg2+与析出的焦磷酸根离子反应生成焦磷酸镁沉淀,羟基萘酚蓝失去了镁离子使得体系颜色变为天蓝色,而未反应的体系则仍保持着紫罗兰色 。另外,HNB可以在LAMP反应前加入,有效的减少了反应污染的可能性。该试剂盒配备变色反应Buffer,其含有羟基萘酚蓝(HNB)指示染料,阳性扩增样品的颜色为天蓝色,阴性扩增为紫罗兰色。 | ||
主要特征 | ||
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组分 | ||
名称50T200T2×HNB LAMP Mix0.65 ml1.25 ml×25M Betain1 ml1 ml×4Bst2.0 DNA Polymerase50 μl200 μl | ||
储存 | ||
-20℃可保存3年,避免反复冻融。 | ||
实例 | ||
对7个样本应用本试剂盒和6条引物扩增HHV-6 DNA,NTC为不加模板的对照,产物以HNB显色如下图。 | ||
LAMP引物设计与实验指南 本公司免费为客户设计LAMP引物,需要设计引物者请来信咨询. | ||
注意事项 | ||
(1). 为了减少交叉污染,请分区操作(试剂和模板DNA的配置操作好在不同区域中进行)。 (2). 实验时,所需模板量取决与样品类型(0.1 ng~100 ng),可先进行预实验确定模板量。 (3). 各区物品均为专用,不可交叉使用,防止污染。 (4). 实验过程中应穿工作服,带手套,建议使用带滤芯的一次性吸嘴。 |