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上海联迈生物工程有限公司

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液体样品蛋白纯化回收试剂盒

价格：￥ 490

品牌：LMAI Bio

供货周期：现货

货号：LM-F413

规格：50次

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液体样品蛋白纯化回收试剂盒

产品及特点
本产品专门用于对液体样品进行蛋白提取浓缩、脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。本产品具有下列特点：
1. 适用于各种液体样品，包括蛋白溶液、胞浆提取液、胞核提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等。也适于原代或传代细胞悬液。
2. 灵敏，对一般蛋白样品，浓度可达 1ug/mL；对含 SDS 的样品，浓度为 5 ug/mL。
3. 蛋白回收率 95%，远高于经典的丙酮或三氯醋酸沉淀法，且可有效去除样品中的脂质，不影响后续 SDS-PAGE 和 Western Blot 等生物实验
4. 得到的蛋白质可用于后续的 SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性，没有活性。
5. 能有效去除液体样品中的盐(1M)、还原剂(1%巯基乙醇或 DTT)、去垢剂(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40)和油脂等。
6. 操作方便迅速，只需要混匀后离心，不需要其他仪器。
7. 产品稳定，可室温长期放置。
运输及保存常温运输和保存，有效期一年。
自备试剂 1M Tris-HCl，pH8.8（也许会用到）

使用方法 使用方法一（用于不含 SDS 的液体样品，但样品蛋白浓度不能低于 1 ug/mL）
1、将 100 μL 需要液体蛋白样品转移到一个自备的 1.5 mL 塑料离心管中。
2、加入 10 μL 溶液 A，涡旋激烈震荡 10-30 秒混匀。
3、冰上放置 15 分钟。
4、加入 10 μL 溶液 B，轻轻混匀。
5、冰上放置 60 分钟。
6、 4℃12000-15000×g 离心 10 分钟。
7、小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8、加入 1 mL 冰浴的溶液 C，震荡混匀后 4℃12000-15000×g 离心 15 分钟。
9、小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
10、短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要 10 分钟左右。
11、样品放 4℃保存或立即电泳检测。可直接用 1×SDS-PAGE 上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质污染，必须加少量自备的 1M Tris-HCl（pH8.8）缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。
使用方法二（用于含 SDS 的液体蛋白样品，但样品蛋白浓度不能低于 5 ug/mL）
1、将 200 μL 液体蛋白样品转移到一个自备的 1.5 mL 塑料离心管中。
2、加入 8 μL 溶液 B，涡旋激烈震荡 10-30 秒混匀。
3、冰上放置 30 分钟或-20℃放置 15 分钟（过夜放置更好）。
4、 4℃ 12000-15000×g 离心 15 分钟。
5、小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
6、加入 1 mL 冰浴的溶液 C，震荡混匀后 4℃ 12000-15000×g 离心 15 分钟。
7、小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8、短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要 10 分钟左右。
9、样品放 4℃保存或立即电泳检测。可直接用 1×SDS-PAGE 上样液或其他泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质污染，必须加少量自备的 1M Tris-HCl（pH8.8）缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。技术资料 TCA 与蛋白质TCA 与蛋白质之间主要有以下几个方面的作用:①在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐.②作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变，暴露出较多的疏水性基团，使之聚集沉淀.③随着蛋白质分子量的增大，其结构复杂性与致密性越大，TCA 可能渗入分子内部而使之较难被完全除去，在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片，而且随时间的延长这一作用愈加明显.④电泳图谱显示，BSA，HSA 单体谱带有较明显的展宽现象，这可能是由于 TCA 的结合，使 SDS与蛋白质的结合量产生偏差，从而造成蛋白质所带电荷的不均一性，造成迁移率的不一致.我们认为在电泳时使用 TCA 对蛋白质样品的浓缩或除盐时，对于分子质量大的蛋白质，要慎重选择 TCA.对小分子量蛋白质的浓缩，采用 TCA 时也有两点需要注意:一是用 TCA 沉淀后，尽量用丙酮彻底抽提 TCA;二是样品处理后要尽快进行电泳分析，以免发生聚集及断裂，造成结果分析的不准确.

生化试剂液体样品蛋白纯化回收试剂盒由上海联迈生物工程有限公司为您提供，如想了解更多关于生物分子液体样品蛋白纯化回收试剂盒的报价、规格、厂家等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应液体样品蛋白纯化回收试剂盒外，上海联迈生物工程有限公司还可为您提供：冻干Fast DNA TaqMan PCR Reagent、阿魏酸 CAS:1135-24-6、 Methyl 6-acetoxyangolensate CAS:16566-88-4

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