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一键询价梅里埃 10400奈瑟氏球菌嗜血菌鉴定盒API NH
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钦诚生物 | 一周
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大肠杆菌BL21 Star(DE3)化学感受态细胞
产品及特点BL21 Star(DE3)感受态细胞来源于 BL21(DE3)菌株,由特殊工艺制作,使用 pUC19质粒检测本产品,转化效率可达 107cfu/μg。BL21 Star(DE3)菌株的特点是含有 rne131 基因突变体。rne131 突变基因能够增强菌株细胞内 mRNA 的稳定性,从而有效提高蛋白表达能力。本产品主要适用于 T7 启动子表达载体(如 pET 系列)的高水平蛋白表达。菌株基因型为:F- ompT hsdSB(rB-mB) gal dcm rne131(DE3)
规格及成分 成分 编号 塑料袋包装
本产品 150801 0.1 mL×10
使用手册 1 份
运输及保存 干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂 目的 DNA、LB 培养基等
使用方法
1. 从-80℃冰箱中取出感受态细胞,置于冰上解冻。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
2. 取 100μL 冰上融化的 BL21 Star(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置 25 分钟。
3. 42℃水浴热激 45 秒,迅速放回冰上并静置 2 分钟,晃动会降低转化效率。
4. 向离心管中加入 700μL 不含抗生素的无菌培养基(LB),混匀后 37℃,200rpm 复苏60 分钟。
5. 取 100μL 左右菌液涂布于含相应抗生素的 LB 培养基上。如果转化高浓度的质粒,可以减少涂布的量。
6. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。