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膜结合DNA清除试剂盒
产品及特点 本产品是在无RNase的DNase的基础上开发的、专门用于在柱式法总RNA抽提过程中,清除硅胶膜上基因组DNA污染的产品,具有下列特点:
1. 快速,反应条件经过优化,能在5分钟内使硅胶膜上的基因组DNA降解。
2. 不含RNase,可以保证RNA分子完整性不受任何影响。
3. 兼容性广,跟大多数柱式RNA提取试剂盒兼容,可以直接整合进去。不需要在提取到总RNA后再单独去除里面的DNA污染。
运输及保存 低温运输、-20℃保存,通用洗柱液和 RNA 洗脱液可以室温保存,有效期一年
自备试剂 无
使用方法
1. 将 0.5 mL 通用洗柱液加入到已经结合了 DNA 和 RNA 的硅胶膜离心吸附柱中 ,12000 rpm 室温离心 10-30 秒。注意:不能使用离子交换吸附柱,Qiagen公司的部分产品使用的是离子交换吸附柱,一部分是硅胶膜离心吸附柱,一定要在实验前弄清楚。
2. 配制 DNase 工作液 50 uL,即将 10 uL RNase-free DNase 加入到 50 uL膜反应液中,在离心管中吹打混匀。注意:对一般的 mini 型离心吸附柱,膜反应液和 DNase 的总体积不要大于 60 uL,否则酶的浓度将降低,影响 DNA去除效果。
3. 将上步得到的混合液全部转移到一步预洗得到的离心吸附柱中。
4. 室温放置 5 分钟。 注意:5 分钟一般足够降解大多数情况下的 DNA 污染。如果 DNA 没有彻底降解(可能由于样品中残留的杂质抑制了 DNase 的活性),此步的保温时间可以适当延长,直到彻底清除为止。
5. 保温结束后,直接在离心管中加入 0.5 mL 的通用洗柱液,12000 rpm 室温离心 10-30 秒。
6. 干甩一次(12000 rpm 室温离心 10-30 秒)。
7. 将 30-100 uL RNA 洗脱液加入到离心吸附柱的膜中央,12000 rpm 室温离心 10-30 秒,洗脱液即是无 DNA 的 RNA 样品。可以立即使用或放-70℃长期保存。