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植物总叶绿素(Total chlorophyll)ELISA试剂盒
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于临床诊断。
以下文字为产品简介,详情以说明书为准,可QQ或联系在线客服索取。
使用目的
适用于检测人动植物组织匀浆、细胞上清、血清、血浆、尿液或其他相关生物液体中浓度。
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法往预先包被抗体的微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
试剂盒规格及配置
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL |
底物A | 6mL | 3mL |
底物B | 6mL | 3mL |
终止液 | 6mL | 3mL |
封板膜 | 2张 | 2张 |
说明书 | 1份 | 1份 |
自封袋 | 1个 | 1个 |
自备物品
①.酶标仪(450nm)
②.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
③.37℃恒温箱
操作步骤
①.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。植物总叶绿素(Total chlorophyll)ELISA试剂盒
②.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
③.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
④.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
⑤.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次 (也可用洗板机洗板)。
⑥.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
⑦.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
植物总叶绿素(Total chlorophyll)ELISA试剂盒