找不到产品?留下需求帮您找
一键询价赛多利斯 Microsart ATMP DNA提取试剂盒
一周
面议
赛多利斯 Microsart AMP DNA提取试剂盒
一周
面议
赛多利斯 Microsart Research 细菌检测试剂盒
一周
面议
赛多利斯 Microsart ATMP 细菌检测试剂盒
一周
面议
赛多利斯 Microsart Research 支原体检测试剂盒
一周
面议
赛多利斯 Microsart® ATMP 支原体检测试剂盒
一周
面议
赛多利斯 Microsart 支原体验证标准品(菌株标准品)
一周
面议
赛多利斯 Microsart 支原体校准试剂(DNA标准品)
一周
面议
赛多利斯 Microsart® 细菌验证标准品(菌株标准品)
一周
面议
赛多利斯 Microsart 细菌校准试剂(DNA标准品)
赛多利斯 | 一周
面议
花生源性成分核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
花生源性成分核酸检测试剂盒(一管式 PCR-荧光探针法)
◆ 产品说明
物种鉴定系列中的过敏原鉴定试剂,可针对食品中过敏原成分的特异核酸片段进行扩增,通过实时扩
增曲线判定结果。本产品用于糕点、糖果、冰淇淋等食品中过敏原花生成分的检测,检出限为 0.01%。
◆ 产品组成(96 测试
试剂 含量
A-花生源-P 20μL × 8 管× 12 排
NG-P 100μL × 3 支
PG-花生源-P 100μL × 2 支
◆ 适用仪器
ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。
◆ 自备耗材和仪器
①冰盒;②移液器(0.5-10μL,10-100μL,100-1000μL)及配套灭菌吸头;③离心机;④涡旋混匀器;⑤金属浴。
◆ 注意事项
1.本试剂检测灵敏度高。为了防止污染,实验要分区操作。
1)一区:样本制备区。
2)第二区:模板添加区。
3)第三区:扩增及产物分析区。
★ 分区之间好进行物理性隔离,避免人为因素造成的污染。
2.实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。
3.严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4.反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心 30
秒,并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。
5.反应结束后,扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。
6.不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。
◆样品处理
参照《SN/T 1961.2-2007 食品中过敏原成分检测方法 第 2 部分:实时荧光 PCR 方法检测花生成分》或其他标
准处理样品,制备的样本保存待用。
称取约 200g 样品,用洁净研钵或合适的粉碎装置将样品粉碎至粉末状。称取 300mg 粉状样品提取 DNA。
样品的采集和制备是过敏原成分鉴别的重要步骤,为防止交叉污染,应使用一次性消耗品,研钵应经 160℃干
烤 2 h,其他不宜干烤或高压处理的器皿应使用 1%次**钠溶液浸泡。
详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。
◆ 实验操作
1.模板制备(样本制备区)
建议使用配套动物基因组 DNA 提取试剂盒,具体过程详见产品说明书。
2.添加模板(模板添加区,放置于冰盒上进行)
请于-20℃条件下保存,有效期 12 个月
SM-022022LⅡ-A02
2
剪下所需测试数的已含有反应液的 PCR 管,放置在室温待解冻后,离心 30 秒后揭开封口膜,向每管反应液
中分别加入 5μL 模板,顺序为 NG、待测样品模板、PG-花生源-P。盖好配套的 PCR 管盖后,涡旋混匀 30s,离心
1min,立即进行 PCR 扩增反应。
3.扩增反应(扩增及产物分析区)
使用荧光定量 PCR 仪,荧光基团选择 FAM,淬灭基团选择 TAMRA。
按下列条件设置扩增反应:
PCR 循环 荧光收集位点
95℃ 10 分钟 1 个循环 —
95℃ 15 秒
45 个循环
—
60℃ 1 分钟 ※
4.基线和阈值设定
基线范围选择一般在 6-15 个循环,如果有强阳性样本,应根据实际情况调整基线范围。阈值线应超过阴性对
照扩增曲线的高点,且 Ct 值不出现任何数值。
◆ 结果判定
检测样品无荧光增幅现象,并且阳性对照、阴性对照、提取对照结果正常者,可判定该样品中未检出过敏原花
生成分。
检测样品 Ct 值≤40,曲线有明显的荧光增幅现象,并且阳性对照、阴性对照、提取对照结果正常者,可判定
该样品中检出过敏原花生成分。
检测样品 Ct 值在 40-45 之间,应重做实时荧光 PCR 反应。再次扩增后的结果 Ct 值仍在 40~45 之间,并且阳性
对照、阴性对照、提取对照结果正常者,可判定该样品中检出过敏原花生成分,否则判定该样品中未检出过敏原花
生成分。
两个平行样中只要有一个样品检测为阳性,即可判定该样品中检出过敏原花生成分。
★ NG 反应为平滑直线,PG 反应为“S”型扩增曲线,此次检测结果有效,否则无效。如重复检测结果仍为无效,请与技术支持
人员联系。