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pSilent-1真菌干扰质粒

pSilent-1真菌干扰质粒

价格: 980

品牌:钦诚生物

供货周期: 现货

货号:QCP0383

型号:2UG

pSilent-1真菌干扰质粒

 

基本信息

 

启动子: TrpC

复制子: pUC oriF1 ori

终止子: TRPC

质粒分类: 丝状真菌载体;RNAi基因沉默干扰质粒

质粒大小: 7056bp

原核抗性: 氨苄青霉素Ampicillin

筛选标记: 潮霉素Hygromycin

克隆菌株: DH5α

培养条件: 37℃,有氧,LB

表达宿主: 丝状真菌

5'测序引物: 根据序列设计

3'测序引物: 根据序列设计

 

质粒简介

pSilent-1质粒是一种用于真菌RNAi基因沉默干扰的载体,其多克隆位点区域的酶切位点有XhoI,SnaBI,HindIII MCS1)和BglII,SphI,StuI,KpnI,ApaIMCS2)等。

pSilent-11.png

 

质粒图谱pSilent-1.png

 

 

pSilent-1真菌干扰质粒使用说明:

    

     1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;

     2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

     3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;

     4、42℃热激90s,再冰浴2min;

     5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;

     6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

     7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

     8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;

     9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。

 

pSilent-1真菌干扰质粒注意事项

 

      1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。

      2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。

 





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