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仪器信息网试剂标物生化试剂生物分子 pHiL-S1毕赤酵母质粒

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上海钦诚生物科技有限公司

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pHiL-S1毕赤酵母质粒

价格：￥ 980

品牌：钦诚生物

供货周期：现货

货号：QCP0361

规格：2UG

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pHiL-S1毕赤酵母质粒

基本信息

启动子: AOX1

复制子: pUC ori，FI ori

质粒分类: 酵母系列，毕赤酵母表达载体

质粒大小: 8260bp

原核抗性: Amp

筛选标记: HIS4

克隆菌株: DH5α

培养条件: 37℃，有氧 LB

表达宿主: 酵母细胞

5'测序引物: AOX5:GACTGGTTCCAATTGACAAGC

3'测序引物: AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT

质粒简介

pHIL-S1载体的详细信息如下：1. pHIL-S1载体大小8,260 bp，是融合表达载体。2.载体构建过程中，可供使用的单一限制性内切酶位点为Xho I, EcoR I, Sma I, BamH I.3.利用PHO1分泌信号肽，分泌表达蛋白基因。 4.在载体构建过程中，你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。5.毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。6.为了将基因插入GS115或KM71的AOX区, 使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型)7.为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型) 8.将基因插入GS115的AOX1区域，需要使用Bgl II线性化质粒 (产生His+MutS基因型)。

质粒图谱

pHiL-S1毕赤酵母质粒使用说明：

1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；

2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；

3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；

4、42℃热激90s，再冰浴2min；

5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；

6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；

7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；

8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。

pHiL-S1毕赤酵母质粒注意事项：

1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。

2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。

生化试剂 pHiL-S1毕赤酵母质粒由上海钦诚生物科技有限公司为您提供，如想了解更多关于生物分子 pHiL-S1毕赤酵母质粒的报价、规格、厂家等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应pHiL-S1毕赤酵母质粒外，上海钦诚生物科技有限公司还可为您提供： HRMVPCS 永生化人视网膜周细胞 QCH791、 L363 人多发性骨髓瘤细胞 QCH792、 Colo680N 人食管鳞癌细胞 QCH793

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