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pCXUN-Myc植物表达质粒
基本信息
启动子: Ubi promoter
终止子: NOS terminator
质粒大小: 12041bp
质粒标签: N-Myc
原核抗性: 卡那霉素Kan
筛选标记: 潮霉素Hyg
克隆菌株: 大肠杆菌DB3.1
培养条件: 37℃,有氧,LB
质粒简介
pCXUN-Myc质粒是一个植物过表达质粒,UBi启动子驱动Myc标签和目的基因融合表达。空载体用XcmI酶切后,会变成T载体,可连入带A的PCR产物,其携带的ccdb致死基因可显著提高基因克隆的阳性率。
质粒图谱
pCXUN-Myc植物表达质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pCXUN-Myc植物表达质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。