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pBI121①植物表达质粒

pBI121①植物表达质粒

价格： ￥ 980

品牌：钦诚生物

供货周期： 现货

货号：QCP0274

规格：2UG

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pBI121①植物表达质粒

 

基本信息

 

启动子: CaMV 35S promoter

复制子: oriV

终止子: NOS

质粒分类: 植物系列，蛋白过表达载体

质粒大小: 14758bp

原核抗性: 卡那霉素Kan

筛选标记: 遗传霉素G418/新霉素Neo

克隆菌株: 大肠杆菌DH5α

培养条件: 37℃，有氧 LB

5'测序引物: 35S:GACGCACAATCCCACTATCC

3'测序引物: 根据序列设计引物

 

质粒简介

     pBI121载体是一个双元植物农杆菌表达载体，能够高效转染植物。该载体来源于pB221和Bin19载体。载体上含有从ColE1来源的ori复制元件，从CaMV中来源的pROK1元件，大肠杆菌新霉素磷酸转移酶II基因（Neomycin phosphotransferase II Gene, NptII），新霉素抗性基因(Neomycin resistant gene, Neo), 敏感基因Beta葡糖苷酸酶(glucuronidase)，Ter 农杆菌Ti 质粒胭脂氨酸合成酶原件等。pBI121载体是卡那抗性质粒。 

pBI121①1.png  

 

质粒图谱pBI121①.png

 

 

pBI121①植物表达质粒使用说明：

    

     1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；

     2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；

     3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；

     4、42℃热激90s，再冰浴2min；

     5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；

     6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；

     7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；

     8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；

     9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。

 

pBI121①植物表达质粒注意事项：

 

      1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。

      2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。

 





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