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获取电话pCHO1.0哺乳抗体质粒
基本信息
启动子: CMV/EF1
复制子: ori
终止子: SV40 poly(A) signal
质粒分类: 哺乳细胞，抗体表达载体
质粒大小: 12988bp
原核抗性: 卡那霉素Kan
筛选标记: 嘌呤霉素Puro
克隆菌株: 大肠杆菌DH5α
培养条件: 37℃，有氧，LB
表达宿主: 哺乳细胞
备注: 拷贝数较低，构建时需要大提质粒
质粒简介
pCHO 1.0载体是由ProBioGen AG设计，能够表达一个基因或利用载体上面的杂交CMV启动子共表达2个目的基因。该载体包含有二氢叶酸还原酶（DHFR）选择性标记和嘌呤霉素（puromycin）抗性基因，可以同时使用MTX和嘌呤霉素进行筛选。
质粒图谱
pCHO1.0哺乳抗体质粒使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pCHO1.0哺乳抗体质粒注意事项：
1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。
