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获取电话pCI-neo哺乳表达质粒
基本信息
启动子: CMV IE
复制子: pUC ori，F1 ori
终止子: SV40 poly（A） signal
质粒分类: 哺乳细胞载体;蛋白过表达质粒
质粒大小: 5472bp
原核抗性: 氨苄青霉素Amp
筛选标记: 新霉素Neo
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃，有氧，LB
表达宿主: 哺乳细胞
培养条件: 37℃，有氧，LB
诱导方式: 无需诱导，瞬时表达
5'测序引物: CMV-F: 5-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3
3'测序引物: EBV-R:5-GTGGTTTGTCCAAACTCATC-3
质粒简介
pCI-neo Mammalian Expression Vector(pCI-neo 哺乳动物表达载体) 携带有人类巨细胞病毒(CMV) 的即刻早期增强子/ 启动子区域，来促进哺乳动物细胞中插入克隆DNA 的组成型表达。此载体也带有新霉素磷酸转移酶基因, 一种哺乳动物细胞的选择性标志物。通过G-418 抗性筛选转染细胞，pCI-neo 载体能够用于瞬时或稳定表达。
质粒图谱
pCI-neo哺乳表达质粒使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pCI-neo哺乳表达质粒注意事项：
1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。
