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获取电话pENTR5-UbCp入门启动子载体质粒
基本信息
别名: pENTR5'-UbCp
启动子: UbC promoter
复制子: pUC ori
质粒分类: 哺乳细胞，GateWay入门载体
质粒大小: 3861bp
原核抗性: 卡那霉素Kan
克隆菌株: 大肠杆菌DB3.1
培养条件: 37℃，有氧，LB培养基
5'测序引物: M13F
3'测序引物: M13R
质粒简介
pENTR5-UbCp载体本身含有CCDb致死基因，能够使得普通的DH5alpha等细菌死亡，所以构建Gateway系统入门克隆时需要使用ccdB敏感的DB3.1感受态细胞。 pENTR5-UbCp vector containing CCDb lethal gene, can make the common DH5alpha and other bacterial death, must use the DB3.1 feeling cell for plasmid amplification;CcdB sensitive OmniMAX2 cells are needed to construct the Gateway system when it is started..
质粒图谱
pENTR5-UbCp入门启动子载体质粒使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pENTR5-UbCp入门启动子载体质粒注意事项：
1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。
