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p3×FLAG-CMV-10哺乳表达质粒

p3×FLAG-CMV-10哺乳表达质粒

价格: 980

品牌:钦诚生物

供货周期: 现货

货号:QCP0186

型号:2UG

p3×FLAG-CMV-10哺乳表达质粒

 

基本信息

 

启动子: CMV promoter

复制子: F1 ori , pUC ori

终止子: SV40 poly(A) signal,hGH poly(A) signal

质粒分类: 哺乳系列质粒;哺乳表达质粒;pCMV系列质粒

质粒大小: 6299bp

质粒标签: N-3×FLAG

原核抗性: 氨苄青霉素Amp(100μg/ml)

筛选标记: 新霉素Neo/G418

克隆菌株: DH5α等大肠杆菌

培养条件: 37℃,有氧 LB

表达宿主: 293T等哺乳细胞

培养条件: 37℃,5%CO2

诱导方式: 无须诱导,瞬时表达

5'测序引物: CMV-F(CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG)

3'测序引物: hGH-PA-R(CCAGCTTGGTTCCCAATAGA)

 

质粒简介

       p3×FLAG-CMV-10表达载体是用于在哺乳动物细胞中建立N-3×FLAG融合蛋白的瞬时或稳定细胞内的pCMV5表达载体的升级版。该载体在多克隆区域上游编码三个相邻的FLAG表位(Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp)。这导致使用FLAG抗体的检测灵敏度增加。第三个FLAG表位包括肠激酶识别序列,允许从纯化的融合蛋白切割3×FLAG肽。

      The p3×FLAG-CMV-10 Expression Vector is a 6.3 kb derivative of pCMV5 used to establish transient or stable intracellular expression of N-terminal 3XFLAG fusion proteins in mammalian cells. The vector encodes three adjacent FLAG® epitopes (Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp) upstream of the multiple cloning region. This results in increased detection sensitivity using ANTI-FLAG M2 antibody. The third FLAG epitope includes the enterokinase recognition sequence, allowing cleavage of the 3XFLAG peptide from the purified fusion protein. Efficiency of replication is optimal when using an SV40 T antigen expressing host.

       p3×FLAG-CMV-10 Expression Vector is a shuttle vector for E. coli and mammalian cells. Efficiency of replication is optimal when using an SV40 T antigenexpressing

host, such as COS cells.

 

质粒图谱p3×FLAG-CMV-10.png

p3×FLAG-CMV-101.png 

 

p3×FLAG-CMV-10哺乳表达质粒使用说明:

    

     1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;

     2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

     3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;

     4、42℃热激90s,再冰浴2min;

     5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;

     6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

     7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

     8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;

     9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。

 

p3×FLAG-CMV-10哺乳表达质粒注意事项

 

      1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。

      2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。

 





生化试剂 p3×FLAG-CMV-10哺乳表达质粒由上海钦诚生物科技有限公司为您提供,如想了解更多关于生物分子 p3×FLAG-CMV-10哺乳表达质粒的报价、规格、厂家等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应p3×FLAG-CMV-10哺乳表达质粒外,上海钦诚生物科技有限公司还可为您提供: UPCISCC090 人舌头鳞癌细胞 QCH766、 KNS62 人肺支气管鳞状细胞癌 QCH767、 HCC95 人肺腺癌细胞 QCH768

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