找不到产品？留下需求帮您找
一键询价-
MKN1 人胃癌细胞 QCH812
一周
3500￥
-
Phoenix-AMPHO 人肾上皮细胞 QCH813
一周
5500￥
-
DBTRG-05MG 人脑胶质细胞瘤细胞 QCH814
一周
3500￥
-
SNU638 人胃癌细胞 QCH815
一周
3500￥
-
NCI-H2073 人非小细胞肺癌细胞 QCH816
一周
5500￥
-
HAL01 人急性淋巴细胞白血病细胞 QCH817
一周
2500￥
-
TMD8 人弥漫性大B细胞淋巴瘤 QCH818
一周
7500￥
-
SNU484 人胃癌细胞 QCH819
一周
3500￥
-
JHH2 人肝癌细胞 QCH820
一周
4500￥
-
LK2 人肺腺癌细胞 QCH821
钦诚生物 | 一周
3500￥
获取电话pUC119大肠克隆质粒
基本信息
启动子: Lac/lac promoter
复制子: ColE1 ori，F1 ori
质粒大小: 3162bp
质粒标签: LacZ
原核抗性: 氨苄青霉素Amp
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃，有氧，LB
5'测序引物: M13R:CAGGAAACAGCTATGACC
3'测序引物: M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT
备注: 蓝白斑筛选，产生单链DNA
质粒简介
pUC119载体是利用pUC19载体的Nde I 酶切位点，插入含有M13 phage DNA Intergenic region (IG) 的HgiA I (5645) - DraI (5941) 片段构建而成的。由于在lacZ基因中含有多克隆位点，因此在含有IPTG、X-Gal的平板培养基上可以很容易地通过蓝白筛选判断载体中有无DNA片段的插入。同时还可以通过载体上的lac promoter表达外源基因，使用M13系列的通用引物对插入载体中的DNA片段进行测序。使用Deletion Kit for Kilo-Sequence (Code No. : 6030) 可以对克隆得到的数千碱基的DNA片段进行测序。
由于pUC119载体中插入了M13 phage DNA的Intergenic region (IG)，因此pUC119载体还可以在Helper phage M13K07的感染下产生单链DNA，包入Phage颗粒内后从菌体内放出，而不存在Helper phage单链DNA的污染。使用本制品时，可以稳定获得单链的长片段DNA (~7kb)，并且没有缺失。
质粒图谱
pUC119大肠克隆质粒使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pUC119大肠克隆质粒注意事项：
1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。
