TAL3392斑马鱼基因质粒
基本信息
启动子: CMV promoter
复制子: ori,F1 ori,SV40 ori
终止子: bGH poly(A) signal
质粒分类: 基因文库质粒;其它基因质粒;其它种源质粒
质粒大小: 8058bp
质粒标签: N-3×FLAG,N-SV40 NLS,C-FokI cleavage
原核抗性: 氨苄青霉素Amp(100μg/ml)
筛选标记: 杀稻瘟菌素blast
克隆菌株: XL1 Blue等大肠杆菌
培养条件: 37℃,有氧,LB
备注: 高拷贝质粒
质粒简介
TAL3392质粒是一个CMV启动表达斑马鱼的 ZebrafishCommunity-vasa-left 基因的真核表达质粒,
Target binding site: TGACTGGGAGGAAGATCA
质粒图谱
TAL3392斑马鱼基因质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
TAL3392斑马鱼基因质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。