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酿酒酵母INVSc1菌种

酿酒酵母INVSc1菌种

价格: 990

品牌:钦诚生物

供货周期: 现货

货号:QC12-147

规格:1ml

酿酒酵母INVSc1菌种

英文名称:Yeast INVSc1 Strain

运输:低温

保存:-80度

有效期:3年

货期:现货

其他:


产品介绍:

INVSc1 是酿酒酵母,具有氨苄和卡纳抗性。质粒转化条件为电转化,应

用于蛋白表达,诱导方法为半乳糖诱导。适宜的生长温度是 28-30 度,一般使

用 30 度培养,温度超过 32 度可能导致细胞的死亡。本菌株是生长快速的双

倍体酵母细胞,为 His、Leu、Trp 和 Ura 营养缺陷型菌株,在缺乏组氨酸,

亮氨酸,色氨酸和尿嘧啶的 SC minimal media 中无法生长。INVSC1 酿酒

酵母是非常理想的蛋白表达菌株,但是不应该用于遗传分析研究,因为该菌株

的孢子形成不好。INVSC1 的配套载体是 pYES3/CT, pYC2, pYES2 系列载

体。

运输及保存 低温运输,-80℃保存,有效期一年。

自备试剂 YPD 培养基、山梨醇、超纯水等

使用方法 

质粒转化酿酒酵母INVSc1菌种的方法有很多,如电转化、化学转化等。根据实验方法的不同,用的试剂和培养基有所不同。本手册提供一个电转化方

法。

1. 挑取酵母单菌落,接种至含有 5 mL YPD 培养基的 50 mL 三角瓶中,

30℃,250-300 r/min 培养过夜;

2. 取 100-500 μL (≤1:100)的培养物接种至含有 50 mL 新鲜培养基的

200 mL 三角摇瓶中,28~30℃,250-300 r/min 培养过夜(约 20 小时),

至 OD600 达到 1.3~1.5;

3. 将细胞培养物于 4℃,1500g 离心 5 分钟,用 50 mL 的冰预冷的无菌水

将菌体沉淀重悬;

4. 按步骤 3 离心,用 25 mL 的冰预冷的无菌水将菌体沉淀重悬;

5. 按步骤 3 离心,用 2-5 mL,1M 的冰预冷的山梨醇溶液将菌体沉淀重悬;

6. 按步骤 3 离心,用 160 μL 的冰预冷的 1M 的山梨醇溶液将菌体沉淀重悬,

其终体积约为 240 uL;

7. 将 5~20 μg 的线性化 DNA 溶解在 5~10 μL TE 溶液中,与 80 μL 的上

述步骤 6 所得的菌体混匀,转至 0.2 cm 冰预冷的电转化杯中;

8. 将电转化杯冰浴 5 分钟;

9. 根据电转化仪提供的资料,参考其他文献及多次摸索,确定合适的电压、

电流、电容等参数,按优化的参数,进行电击(推荐:电压 1.5 kV ;电

容 25 μF ;电阻 200 Ω;电击时间为 4 ~10 msec)。

10. 电击完毕后,马上加入 1 mL 1M 的冰预冷的山梨醇溶液将菌体混匀,转

至 1.5 mL 的 EP 管中,置于 30℃摇床低速培养 1 小时;

11. 将菌体悬液涂布于 MD 平板上,每 200~600 μL 涂布一块平板;

12. 将平板置于 30℃倒置培养,直至单个菌落出现(3-4 天)。






生化试剂 酿酒酵母INVSc1菌种由上海钦诚生物科技有限公司为您提供,如想了解更多关于生物分子 酿酒酵母INVSc1菌种的报价、规格、厂家等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应酿酒酵母INVSc1菌种外,上海钦诚生物科技有限公司还可为您提供: HAL01 人急性淋巴细胞白血病细胞 QCH817、 TMD8 人弥漫性大B细胞淋巴瘤 QCH818、 SNU484 人胃癌细胞 QCH819
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