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酿酒酵母EBY100菌种

酿酒酵母EBY100菌种

价格： ￥ 990

品牌：钦诚生物

供货周期： 现货

货号：QC12-198

规格：1ml

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酿酒酵母EBY100菌种

英文名称：Saccharomyces cerevisiae EBY100

运输：低温

保存：-80度

有效期：3年

货期：现货

其他：


产品介绍：

EBY100 是酿酒酵母菌株，属于真核细胞，具有氨苄和卡那霉素抗性。 质粒转化条件为电转化，应用于酵母表面展示。此菌株必须生长在营养丰富的 培养基中，例如 YPD 培养基，无法在 minimal media 中生长。在 GAL1 启 动子的作用下，此菌株能够表达 AGA1 基因。EBY100 的配套载体是 pYD1 载体。此菌株的基因型如下：MATα ura3-52 trp1 leu2?1 his3?200 pep4::HIS3 prb1?1.6R can1 GAL (pIU211: URA3)。

运输及保存 低温运输，-80℃保存，有效期一年。

自备试剂 YPD 培养基、山梨醇、超纯水等

使用方法 

质粒转化酿酒酵母EBY100菌种的方法有很多，如电转化、化学转化等。根据实验方法的不同，用的试剂和培养基有所不同。本手册提供一个电转化方

法。

1. 挑取酵母单菌落，接种至含有 5 mL YPD 培养基的 50 mL 三角瓶中，

30℃，250-300 r/min 培养过夜；

2. 取 100-500 μL （≤1:100）的培养物接种至含有 50 mL 新鲜培养基的

200 mL 三角摇瓶中，28~30℃，250-300 r/min 培养过夜(约 20 小时)，

至 OD600 达到 1.3~1.5；

3. 将细胞培养物于 4℃，1500g 离心 5 分钟，用 50 mL 的冰预冷的无菌水

将菌体沉淀重悬；

4. 按步骤 3 离心，用 25 mL 的冰预冷的无菌水将菌体沉淀重悬；

5. 按步骤 3 离心，用 2-5 mL，1M 的冰预冷的山梨醇溶液将菌体沉淀重悬；

6. 按步骤 3 离心，用 160 μL 的冰预冷的 1M 的山梨醇溶液将菌体沉淀重悬，

其终体积约为 240 uL；

7. 将 5~20 μg 的线性化 DNA 溶解在 5~10 μL TE 溶液中，与 80 μL 的上

述步骤 6 所得的菌体混匀，转至 0.2 cm 冰预冷的电转化杯中；

8. 将电转化杯冰浴 5 分钟；

9. 根据电转化仪提供的资料，参考其他文献及多次摸索，确定合适的电压、

电流、电容等参数，按优化的参数，进行电击（推荐：电压 1.5 kV ；电

容 25 μF ；电阻 200 Ω；电击时间为 4 ～10 msec）。

10. 电击完毕后，马上加入 1 mL 1M 的冰预冷的山梨醇溶液将菌体混匀，转

至 1.5 mL 的 EP 管中，置于 30℃摇床低速培养 1 小时；

11. 将菌体悬液涂布于 MD 平板上，每 200~600 μL 涂布一块平板；

12. 将平板置于 30℃倒置培养，直至单个菌落出现（3-4 天）。






生化试剂 酿酒酵母EBY100菌种由上海钦诚生物科技有限公司为您提供，如想了解更多关于生物分子 酿酒酵母EBY100菌种的报价、规格、厂家等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应酿酒酵母EBY100菌种外，上海钦诚生物科技有限公司还可为您提供： HRMVPCS 永生化人视网膜周细胞 QCH791、 L363 人多发性骨髓瘤细胞 QCH792、 Colo680N 人食管鳞癌细胞 QCH793
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