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改良Lowry法蛋白定量试剂盒

改良Lowry法蛋白定量试剂盒

价格: 790

品牌:钦诚生物

供货周期: 现货

货号:QC101102-1000

规格:1000次

改良Lowry法蛋白定量试剂盒

英文名称:Modified Lowry Protein Assay Kit

运输:常温

保存:常温

有效期:1年

货期:1-2天

其他:


产品介绍:

改良Lowry法蛋白定量试剂盒,更抗干扰

产品及特点 

Folin 酚试剂(磷钼酸和磷钨酸混合物)跟蛋白质中含酚氨基酸(色氨酸

和酪氨酸)发生颜色反应,可用于测定蛋白质浓度,但灵敏度较低。Lowry

在此基础上加入 Biuret(双缩脲)反应步骤,即先在碱性条件下使蛋白质和

Cu+形成复合物,再使其与 Folin 酚试剂发生显色反应,产物在 750nm 检测。

Lowry 法使不含酚的蛋白质也能被检测出来,灵敏度是单独使用 Folin 酚的

10 倍左右,是双缩脲反应的 200 倍,因此成为早期检测蛋白浓度的主要方法。

Lowry 检测原理图如下:

传统 Lowry 法受到很多常用的试剂(如 DTT、糖、甘油、Triton 等)干

扰,步骤繁琐。本公司对 Lowry 法进行改良,具有下列特点:

1. 即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。

2. 能抵抗部分干扰物(如一定浓度 SDS 或其他去污剂)的干扰。

3. 检测线性范围广,在 2-100 μg,检测上限比经典 Lowry 法高 30%-40%。


使用手册 1 份

运输及保存 常温运输和保存(但 BSA 标准品需要-20℃保存),有效期一年。

自备试剂 去离子水、蛋白样品、样品缓冲液

使用方法 一:准备工作

1、 制备溶液 A:将 16 mL 溶液 A 成分二和 16 mL 溶液 A 成分三加入到装

溶液 A 成分一的塑料瓶中,混合均匀得到 240 mL 溶液 A。注意:溶液 A

各成分分开提供更加稳定。

2、 制备 Lowry 工作液:将溶液 A、溶液 B 和溶液 C 按 3:1:1 的体积比混

合得到 Lowry 工作液。此工作液可以室温放置 2-3 周,所以最好用多少

配多少。如果发现溶液 B 或溶液 C 有沉淀,需 37℃溶解并摇匀后再使用。

3、 制备福林酚工作液:在装有 10 mL 福林酚的棕色塑料瓶中加入 90 mL 去

离子水,摇晃混匀待用。此工作液在避光条件下可以放置 6 个月。

二:试管法

4、 先用去离子水将 BSA 标准(2 mg/mL)稀释到 50 ug/mL,然后在标记

的试管中加入下列成分(单位:uL)。注意:每个样品最好做三个稀释度,

每个稀释度最好设置三次重复,阴性对照和标准品也最好做三次重复。

标准品(每个做三次重复,此处只列出一个)

编号 BSA 标准

(50 ug/mL) 水 总体积

阴性对照 0 0 200

1 0 200 200

2 25 175 200

3 50 150 200

4 100 100 200

5 150 50 200

6 200 0 200

样品(以 1 个样品、3 个稀释度为例,每个稀释度三个重复,

此处只列出一个)

编号 样品 总体积

1 200 (稀释度 1) 200

阴性对照 1

200(用稀释度 1 稀释的溶解蛋

白样品的缓冲液) 200

2 200 (稀释度 2) 200

阴性对照 2

200(用稀释度 2 稀释的溶解蛋

白样品的缓冲液) 200

3 200 (稀释度 3) 200

阴性对照 3 200(用稀释度 3 稀释的溶解蛋

白样品的缓冲液) 200

5、 每管中加入 200 uL Lowry 工作液,振荡混匀后室温反应 10 分钟。

6、 每管中加入 100 uL 福林酚工作液,振荡混匀后室温反应 30 分钟。

7、 用容量为 0.5 mL、光径为 1 cm 的玻璃比色杯或聚苯乙烯比色杯测定 750

nm 的光吸收。测定时,先空白(即阴性对照)后样品,测定样品和 BSA

标准品时,先低浓度后高浓度。测定未知样品前需要将杯子清洗干净,必

要时可以用甲醇清洗吸附到比色杯壁上的染料。

8、 根据标准品三个重复的平均值绘制标准曲线,然后根据未知样品的光吸收

从标准曲线中查得其对应的浓度。

三:96 微孔板法

9、 同上,只是反应用 96 微孔板设置,用酶标测试仪 750 nm 测定光吸收。

四、样品中干扰物质的去除(本产品不含相关产品,

如果样品中有干扰 Lowry 法蛋白定量的物质(见附表),可另购本公司的

微量蛋白质沉淀试剂盒(CAT#:81217-50)去除,也可以用自备试剂按下法

去除:用水将样品调到体积为 200 uL, 加入 20 uL 0.15%去氧胆酸钠,混匀,

室温放置 10 分钟。加入 20 uL 72%的 TCA,室温放置 5 分钟。3000 g 离心

15 分钟,小心去除上清。用 200 ul 水溶解蛋白沉淀后以用于 Lowry 法测定。






生化试剂 改良Lowry法蛋白定量试剂盒由上海钦诚生物科技有限公司为您提供,如想了解更多关于生物分子 改良Lowry法蛋白定量试剂盒的报价、规格、厂家等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应改良Lowry法蛋白定量试剂盒外,上海钦诚生物科技有限公司还可为您提供: MKN1 人胃癌细胞 QCH812、 Phoenix-AMPHO 人肾上皮细胞 QCH813、 DBTRG-05MG 人脑胶质细胞瘤细胞 QCH814
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