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柱式miRNA PAGE胶回收试剂盒
英文名称:Column PAGE miRNABACK
运输:常温
保存:常温
有效期:1年
货期:现货
其他:
产品介绍:
用于回收PAGE电泳后得到的miRNA片段
产品及特点
本产品是 miRNA 聚丙烯酰胺凝胶回收产 miRNABACK
的柱式升级产品,可用于回收 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的
microRNA(miRNA)分子。它具有下列特点:
1. 可以回收 15-3000nt 范围内的各种长度的 RNA,包括 100nt 以下的 miRNA
片段。
2. 柱式回收法,比沉淀法更见简单快捷。
3. miRNA 回收率在 70%左右。
4. 一站式,即开即用,操作简单,用户不需要自备任何试剂。
5. 扩容性好,可小规模操作,也可以大规模操作。
运输及保存 常温运输,4℃保存(RNA 洗脱液4℃保存),有效期一年。
自备试剂 PAGE 胶
使用方法 1. 切取含 miRNA 片段的 PAGE 凝胶(100 mg 左右,尽可能多地把多余的胶切
除,否则会影响回收效率),放入 1.5 mL 塑料离心管中,用移液枪头尽可能将
其捣碎(先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎),捣得越细越好。
2. 加入 300 uL 溶液 A。
3. 将离心管水平放置并室温摇晃 3 小时以让 miRNA 从 PAGE 凝胶中扩散出来。
如果回收的 RNA 片段长度超过 100 nt,摇晃时间应适当延长。提高温度到
45-65℃,RNA 扩散速度会增加。
4. 12000-15000 g 室温离心 1-2 分钟,将含 RNA 的上清液转移到一个新的 5mL
的塑料离心管中。
5. 加入 300 uL 溶液 B、300 uL 溶液 C 和 750 uL 溶液 D 混合均匀将离心管中
的溶液分两次转移到离心吸附柱中,每次转移后都先静置 3 分钟,然后再
12000-15000 g 离心 1 分钟,倒掉收集管中的液体。
6. 加入 700 uL 通用洗柱液于离心吸附柱中。12000-15000 g 离心 1 分钟,倒
弃收集管中的废液。
7. 12000-15000 g 离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
8. 将离心吸附柱置于一新的干净的离心管(自备)中,加入 25-50 uL RNA 洗脱
液,静置 3 分钟。
9. 12000-15000 g 离心 1 分钟,离心管底部所得溶液即为纯化的 miRNA 溶液,
可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
10. 可以 PAGE 电泳检查回收效率,使用高灵敏的超快核酸银染试
剂染色以节约 miRNA 样品的用量。