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仪器信息网试剂标物生化试剂生物分子小鼠角膜内皮细胞

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上海钦诚生物科技有限公司

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小鼠角膜内皮细胞

价格：￥ 3930

品牌：钦诚生物

供货周期：现货

货号：QCPM3090

规格：5×105

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细胞简介：

角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不同，中央部最薄。角膜分为五层，由前向后依次为：内皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。角膜内皮细胞是角膜内层的单层细胞，构成了后弹力层和房水之间的物理屏障，通过离子“泵”功能调节角膜中离子浓度和水分，维持角膜的半脱水状态，保证角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜内皮细胞功能出现紊乱，常导致角膜水肿而使角膜部分甚至完全失去透明性。角膜内皮细胞主要功能有：①角膜是唯一的无血管的组织，具有透明的特性和合成许多蛋白的功能；②角膜内皮细胞对角膜透明性有重要作用；③角膜内皮细胞通过Na+-K+-ATP酶活性，维持角膜和房水内Na+梯度，防止水分渗入角膜内，维持角膜实质层相对脱水状态，维持透明性。

本公司生产的小鼠角膜内皮细胞采用酶解法制备而来，细胞总量约为5×10⁵/T25方瓶，vWF、Factor VIII免疫荧光鉴定呈阳性，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基信息：

我们推荐使用钦诚生物研制的小鼠角膜内皮细胞专用完全培养液作为体外培养小鼠角膜内皮细胞的培养基。

二、使用方法

1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：

取出T-25cm²培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO₂细胞培养箱中静置4-6小时或过夜，以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm²培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.125%胰蛋白酶消化液约2ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm/min，离心5min；

3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，放入37℃，5%CO₂细胞培养箱中培养；

4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。

3、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm²培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.125%胰蛋白酶消化液约2ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后轻轻吹打细胞使之脱落，再加入完全培养液终止消化，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm/min，离心5min；

3）用适当量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=7:2:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏：

1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至15ml无菌离心管中，滴加入完全培养液5ml混匀细胞，然后将细胞悬液转移至适当面积大小的培养皿中；

3）放置于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。

三、注意事项

1、培养基于4℃条件下可保存3-6个月；

2、在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作；

3、该细胞只可用于科研；

生化试剂小鼠角膜内皮细胞由上海钦诚生物科技有限公司为您提供，如想了解更多关于生物分子小鼠角膜内皮细胞的报价、规格、厂家等信息，欢迎来电或留言咨询。除供应小鼠角膜内皮细胞外，上海钦诚生物科技有限公司还可为您提供： MKN1 人胃癌细胞 QCH812、 Phoenix-AMPHO 人肾上皮细胞 QCH813、 DBTRG-05MG 人脑胶质细胞瘤细胞 QCH814

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