找不到产品？留下需求帮您找
一键询价-
赛多利斯 Microsart ATMP DNA提取试剂盒
7天
面议
-
赛多利斯 Microsart AMP DNA提取试剂盒
7天
面议
-
赛多利斯 Microsart Research 细菌检测试剂盒
7天
面议
-
赛多利斯 Microsart ATMP 细菌检测试剂盒
7天
面议
-
赛多利斯 Microsart Research 支原体检测试剂盒
7天
面议
-
赛多利斯 Microsart® ATMP 支原体检测试剂盒
7天
面议
-
赛多利斯 Microsart 支原体验证标准品（菌株标准品）
7天
面议
-
赛多利斯 Microsart 支原体校准试剂（DNA标准品）
7天
面议
-
赛多利斯 Microsart® 细菌验证标准品（菌株标准品）
7天
面议
-
赛多利斯 Microsart 细菌校准试剂（DNA标准品）
赛多利斯 | 一周
面议
获取电话
流行性出血热病毒探针法荧光定量PCR试剂盒PCR在分子克隆和DNA分析中有多种用途，下面就向大家介绍PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：流行性出血热病毒探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤
典型的PCR由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
实验过程：
一、流行性出血热病毒探针法荧光定量PCR试剂盒试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、流行性出血热病毒探针法荧光定量PCR试剂盒注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。zui好设立一个专用的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
相关PCR产品列表：
15-63600 Enterinvasive E.coli(EIEC)肠侵袭性大肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-39600 Enteroadhesive E.Coli(EAEC)肠粘附性大肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-38210 Enterobacter aerogenes产气肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-38220 Enterobacter cloacae阴沟肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-38230 Enterobacter sakazaki阪崎肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-38200 Enterobacter spp.肠杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-62000 Enterococcus casseliflavus铅黄肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-67900 Enterococcus faecalis 粪肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-90600 Enterococcus faecium 屎肠球菌探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-62000 Enterococcus spp.肠球菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-61500 Enterocytozoon bieneusi 比氏肠微孢虫探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-24400 Enterocytozoon hepatopenaei（EHP）虾肝肠微胞虫探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-62830 Enterohemorrhagic E. coli(EHEC)肠出血性大肠杆菌O104:H4血清型探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-62820 Enterohemorrhagic E. coli(EHEC)肠出血性大肠杆菌O157:H7血清型探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-62810 Enterohemorrhagic E. coli(EHEC)肠出血性大肠杆菌O157血清型探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-62800 Enterohemorrhagic E. coli(EHEC)肠出血性大肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-40200 Enteropathogenic E.coli(EPEC)肠致病性大肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-63710 Enterotoxigenic E.coli(ETEC)产肠毒素性大肠杆菌O139血清型探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-63700 Enterotoxigenic E.coli(ETEC)产肠毒素性大肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-57010 Enterovirus(EV)肠道病毒A组探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次
15-57020 Enterovirus(EV)肠道病毒B组探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次
15-57030 Enterovirus(EV)肠道病毒C组探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次
15-57040 Enterovirus(EV)肠道病毒D组探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次
15-57000 Enterovirus(EV)肠道病毒通用探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次
15-12100 Eperythrozoon spp.附红细胞体属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
15-37700 Epidemic Encephalitis B乙型脑炎病毒(同日本脑炎病毒)探针法荧光定量RT-PCR试剂盒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒) 50次
15-44600 Epidermophyton floccosum絮状表皮癣菌探针法荧光定量PCR试剂盒 50次
流行性出血热病毒探针法荧光定量PCR试剂盒多少钱?
LMAI BioPCR试剂的应用资料有吗？
LMAI BioPCR试剂货号LM18-19200报价含票含运吗？
LMAI Bio货号LM18-19200货期是多久？
LMAI-BIO流行性出血热病毒探针法荧光定量PCR试剂盒可以申请试用吗？
LMAI-BIOLMAI BioPCR试剂售后政策是什么？
流行性出血热病毒探针法荧光定量PCR试剂盒有现货吗？
