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大鼠神经小胶质细胞
一、产品简介
1. 产品名称:大鼠神经小胶质细胞
2. 组织来源:脑组织
3. 产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4. 细胞简介:
大鼠神经小胶质细胞分离自脑组织;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面,即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积);半球表面有很多深浅不等的沟或裂,沟或裂之间的隆起叫回,它们大大增加了大脑的表面积;大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔,使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。小胶质细胞是神经胶质细胞的一种,相当于脑和脊髓中的巨噬细胞,是中枢神经系统(CNS)中的第一道也是最主要的一道免疫防线。小胶质细胞大约占大脑中的神经胶质细胞的20%,小胶质细胞不停地清除着中枢神经系统中的损坏的神经,斑块及感染性物质。无数临床上和神经病理学研究表明激活的小胶质细胞在神经退化类疾病的发病机理中起到十分重要的作用,如帕金森病、多发性硬化和阿兹海默症等。但是过多激活或失控的小胶质细胞会引起神经毒性。它们是促炎因子和氧化应激的重要来源,如肿瘤坏死因子(TNF),一氧化氮,白介素等有神经毒性的物质。神经小胶质细胞的主要功能:①神经胶质出现在大脑发育早期向成熟阶段转化的过程中;②当程序性细胞死亡时,或在大脑发育的过程中,中枢神经系统受损或受到病理损坏时,神经胶质可做为大脑的巨噬细胞;③胶质细胞能在Ⅱ类组织相容性复合体表达CD-4阳性T细胞时表达抗原,能进行Fc介导的巨噬作用,并且与造血细胞和巨噬细胞组织共享抗原。
本公司生产的大鼠神经小胶质细胞采用酶消化法结合差速贴壁法,在培养基营养缺失数天后经摇床震荡收集脱落细胞制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞经CD11b/c[OX42]免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息:
DMEM[H]、FBS、胶质细胞生长添加剂、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用大鼠神经小胶质细胞专用完全培养基作为体外培养大鼠神经小胶质细胞的培养基。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
在技术部标准操作流程下,大鼠神经小胶质细胞可传3-5代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2-1:3适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
产品的运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。