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人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒操作步骤

人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒操作步骤

价格: 面议

品牌:远慕

供货周期: 现货

货号:ym-r00502

规格:48t/96t

CAS:电询

上海远慕生物科技详细介绍人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒操作步骤,注意事项,实验原理,用途,特点,说明书,价格,品牌等详情,本司专业供应进口/国产ELISA试剂盒,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,培养基,抗体,蛋白质,微生物,动物血清,标准品对照品,化学试剂,生化试剂,染色试剂盒,缓冲液,实验耗材,其他试剂,提供ELISA试剂盒免费代测服务,一周内出结果,欢迎订购!



中文名:人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒
别名:人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA Kit
供应商:上海远慕
规格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6个月
特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。
用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。
常见ELISA试剂盒:白介素、选择素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、干扰素、转化生长因子、趋化因子、细胞因子受体、粘附分子、生长因子、凋亡因子等等。
适用范围:仅用于科研实验,禁用于临床。


人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒使用优点:ELISA试剂盒可特异性定量测定疾病相关蛋白,包括细胞因子、趋化因子、β淀粉样蛋白与信号转导靶标。

1.灵敏,准确和一致的性能

2.用血清、血浆、组织培养上清或裂解产物进行过验证

3.在半天内可完成的现成,方便的检测




人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA检测试剂盒样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。



人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒操作步骤注意事项:
1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
3.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
8.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
9.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
10.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。



人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒组成及试剂配制:
1.酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10.终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

 


人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。



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