找不到产品?留下需求帮您找
一键询价大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒注意事项,操作步骤,用途,规格,价格,品牌等详情由上海远慕生物科技提供详细介绍,本司专业销售进口/国产ELISA检测试剂盒,动物血清,标准品对照品,培养基,抗体,染色液,实验耗材,其他科研试剂盒,提供ELISA试剂盒免费代测服务,动物种属有大鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒,人ELISA试剂盒,鸡ELISA试剂盒,猪ELISA试剂盒,狗ELISA试剂盒,羊ELISA试剂盒,兔ELISA试剂盒工,植物ELISA试剂盒,其他动物试剂盒,欢迎来电洽谈!
大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒注意事项详细介绍:
中文名:大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒
别名:大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA Kit
供应商:上海远慕
规格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6个月
检测原理:狗胆囊收缩素(CCK)ELISA试剂盒采用双抗体夹心ABC-ELISA法
用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。
预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-38含量。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本,例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。
大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒实验准备:
1. ELISA试剂盒及待测样本
2. 酶标仪(450nm波长滤光片)
3. 高精度移液器,EP管及一次性吸头
4. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
5. 吸水纸
大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA检测试剂盒液体类标本:
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1)血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/
分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并
放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5)组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒操作步骤:
标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,依次进行稀释数倍。
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液:将30倍(48T 的20 倍)浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
温育:操作同3。
洗涤:操作同5。
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒注意事项:
1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4、请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6、底物请避光保存。
7、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9、本试剂不同批号组分不得混用。
大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%。
大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒基本原理:
①抗原或抗体能吸附到固相载体表面,并保持其免疫学活性;
②抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,仍保持其免疫学和酶学活性;
③酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。
大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA检测试剂盒标本的采集及保存:
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
本司ELISA试剂盒具有以下优点:
1)快速: 仅需传统夹心法ELISA 1/3的操作时间,1小时即可完成整个试验流程;
2)简单: 只需1个洗涤步骤;
3)灵活: 可单独或同时检测总蛋白及磷酸化蛋白,可在同一板上检测不同的靶蛋白;
4)灵敏: 达到甚至超过行业标准,且结果一致性良好;
5)兼容: 常规比色法检测,实验室常规酶标仪读数;